| 结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的克隆表达及效价测定 |
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| 作者姓名： | 都伟欣 陈保文 沈小兵 苏城 王国治 |
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| 作者单位： | 中国药品生物制品检定所,北京,100050 中国药品生物制品检定所,北京,100050 中国药品生物制品检定所,北京,100050 中国药品生物制品检定所,北京,100050 中国药品生物制品检定所,北京,100050 |
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| 摘 要： | 目的 在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌RD1区CFP10-ESAT6融合蛋白,测定融合蛋白对结核分枝杆菌致敏豚鼠的效价.方法 以结核分枝杆菌标准株H37Rv为模板,采用Overlap PCR方法扩增CFP10-ESAT6融合基因,并克隆入pET-30a质粒,IPTG诱导工程菌表达融合蛋白,离子层析柱分离纯化融合蛋白.以结核分枝杆菌致敏豚鼠进行皮肤变态反应(DTH)测定. 结果 结核分枝杆菌融合蛋白在大肠杆菌中以可溶形式表达,融合蛋白占总菌体蛋白的30%以上,经离子层析柱纯化纯度达95%以上.重组蛋白可诱导结核分枝杆菌致敏豚鼠产生迟发型超敏反应,2.5 μg/ml 重组蛋白诱导豚鼠皮试反应与TB-PPD(50 IU/ml) 等效.结论 重组融合蛋白有望成为结核感染皮试诊断用新试剂.
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| 关 键 词： | 分枝杆菌,结核 重组CFP10-ESAT6融合蛋白 豚鼠 皮试 |
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