表达幽门螺杆菌UreB减毒鼠伤寒沙门氏菌对小鼠的免疫保护作用

目的：构建表达幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori)尿素酶B亚单位（UreB)减毒鼠伤寒沙门氏疫苗菌，研究其对小鼠抗H.pylori的免疫保护作用。方法：用PCR扩增ureB，将其克隆入高效原核表达质粒pTrc99A，进行基因测序，重组质粒鉴定后导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261。用SDS聚丙烯安凝胶电泳、Western blot和薄层扫描进行目的蛋白表达分析。C57BL／6小鼠用重组菌免疫，4周后用H.pyloriSS1攻击，再4周后处死小鼠，取胃做快速尿素酶试验和H.pylori定量培养，对照观察免疫效果。结果：构建了携带ureB的重组原核表达质粒pTrc99A-ureB，并将它成功转化了减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261。重组菌SL3261(pTrc99A-ureB）表达了约66ku的UreB。与对照组相比，重组菌免疫组H.lpylori定植水平明显下降（P＜0．05）。结论：构建了表达H.pylori UreB的重组减毒鼠伤寒沙门疫苗菌，该菌株对C57BL／6有免疫保护作用。