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| 旋毛虫钙网蛋白表达纯化及其与补体C1q互作位点的初探 | |
| 作者姓名： | 余文 黄京京 李京默 张冬琬 贾智惠 诸欣平 |
| 作者单位： | 首都医科大学基础医学院病原生物学系寄生虫学教研室 |
| 基金项目： | 北京市自然科学基金项目(7214213);;国家自然科学基金项目(81672042); |
| 摘 要： | 旋毛虫钙网蛋白(Trichinella spiralis calreticulin, Ts-CRT)可以通过与宿主补体C1q互作后,帮助虫体逃避宿主补体系统介导的免疫杀伤。为研究Ts-CRT与C1q相互作用的分子结构基础,本研究首先通过分子克隆和亲和层析等方法获得了高纯度的重组蛋白Ts-CRT380;其次通过微量热涌动(microscale thermophoresis, MST)实验测定Ts-CRT380与C1q相互作用能力;然后利用Discovery Studio软件模拟Ts-CRT与C1q的分子对接,分析Ts-CRT上参与互作的关键位点,并与4种蠕虫CRT相应位点进行序列比对,分析其保守性。结果显示,Ts-CRT380与C1q解离常数Kd值为149μmol/L,证明二者存在中等强度的相互作用,Ts-CRT通过K145、W323、F77和K47等17个氨基酸残基与人源C1q互作,序列比对证实这17个氨基酸位点在5种蠕虫CRT中高度保守。本研究结合MST实验与生物信息学分析,获得了Ts-CRT与人... |
| 关 键 词： | 旋毛虫钙网蛋白 补体C1q 免疫逃逸 微量热涌动 分子对接 |