茶多酚在草酸和一水草酸钙诱导HK-2细胞损伤中的保护作用

目的：探讨茶多酚（tea polyphenol，TP）在草酸和一水草酸钙（calcium oxalate monohydrate，COM）晶体诱导人近端肾小管上皮细胞（HK-2）损伤中的保护作用。方法：实验共分为4组：阴性对照组、阳性对照组（COM晶体+草酸溶液）、茶多酚组（茶多酚+COM晶体+草酸溶液）、维生素E组（维生素E+COM晶体+草酸溶液）。应用MTT法于4、8、12和24 h检测各组细胞活性，同时测定上清液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）浓度、Na⁺ /K⁺ATP酶活性以评估细胞膜完整性和损伤程度；测定过氧化氢（H₂O₂）、丙二醛（methane dicarboxylic aldehyde，MDA）浓度及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性以判定脂质过氧化程度。透射显微镜下观察4和12 h每组细胞形态结构的变化。结果：HK-2细胞经过草酸及COM晶体处理后，各个时间点细胞活性、Na⁺ /K⁺ ATP酶及SOD活性均明显下降，LDH、MDA及H₂O₂浓度升高；与阳性对照组相比，茶多酚组细胞活性、Na⁺ /K⁺ATP酶活性及SOD活性均明显升高，LDH、MDA及H₂O₂浓度明显降低；维生素E组细胞活性、Na⁺ /K⁺ATP酶活性较阳性对照组变化不大，但SOD活性较阳性对照组明显升高，LDH、MDA及H₂O₂浓度较阳性对照组明显降低。透射显微镜观察发现各组HK-2细胞形态结构均出现不同程度变化，茶多酚组、维生素E组出现空泡、线粒体肿胀、核膜及细胞膜溶解、核仁消失的细胞数明显少于阳性对照组；同一时间点茶多酚组细胞结构异常改变要小于维生素E组。结论：茶多酚及维生素E能够通过抑制COM晶体及草酸诱导的脂质过氧化反应和提高细胞内抗氧化酶活性减少细胞损伤，茶多酚清除氧自由基对上皮细胞损伤的能力要强于维生素E。