| ATF-2基因RNA干扰表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 毛卫未,熊芃,韩峰,胡志坚.ATF-2基因RNA干扰表达载体的构建及鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2012,28(9):985-987. |
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| 作者姓名： | 毛卫未 熊芃 韩峰 胡志坚 |
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| 作者单位： | 1. 九江学院临床医学院检验科
2. 九江学院图书馆,江西九江,332000 |
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| 摘 要： | 目的:构建活化转录因子2(ATF-2)基因RNA干扰的真核表达载体,观察其对HepG2肝癌细胞株增殖及凋亡的影响。方法:根据ATF-2 mRNA序列,合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入质粒载体PBA-siU6,DNA测序鉴定重组质粒PBA-siATF-2。脂质体介导质粒转染HepG2细胞。Westernblot法检测ATF-2蛋白表达;MTT方法检测细胞增殖率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率。结果:ATF-2基因RNA干扰载体经测序分析证实插入64 bp序列正确无误;Westernblot法显示干扰组细胞内ATF-2蛋白表达量明显降低;ATF-2基因的下调导致HepG2细胞增殖阻滞和凋亡发生。结论:成功构建了ATF-2基因RNAi真核表达载体,下调HepG2细胞ATF-2基因表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。
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| 关 键 词： | ATF-2基因 RNA干扰 表达载体 |
Construction and identification of small interfering RNA expression vector targeting ATF-2 gene |
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| MAO Wei-wei
,
XIONG Peng
,
HAN Feng
,
HU Zhi-jian.Construction and identification of small interfering RNA expression vector targeting ATF-2 gene[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2012,28(9):985-987. |
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| Authors: | MAO Wei-wei XIONG Peng HAN Feng HU Zhi-jian |
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| Institution: | 1Department of Laboratory Medicine,Faculty of Clinical Medicine;2Library,Jiujiang University,Jiujiang 332000,China |
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