人可溶型FcγRIIb的制备及其功能初步研究 |
| |
引用本文: | 张雷,曹秀琴,杨志伟.人可溶型FcγRIIb的制备及其功能初步研究[J].细胞与分子免疫学杂志,2012,28(9):952-955. |
| |
作者姓名: | 张雷 曹秀琴 杨志伟 |
| |
作者单位: | 1. 宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系 2. 生育力保持省部级共建教育部重点实验室,宁夏银川,750004 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金,宁夏教育厅高等学校科学研究项目 |
| |
摘 要: | 目的:检测正常人和SLE患者血清中可溶型FcγRIIb(husFcγRIIb)含量,诱导表达并纯化人可溶性FcγRIIb,检测其与血清中免疫复合物结合力及对B细胞抗体分泌功能的影响。方法:ELISA法检测人血清中可溶型FcγRIIb含量,IPTG诱导含有pET-sFcγRIIb的大肠杆菌BL21,镍琼脂糖磁珠纯化目的蛋白,可溶型FcγRIIb包被ELISA板,ELISA方法检测其与血清中免疫复合物结合能力,免疫磁珠法分选B细胞,分组刺激培养,ELISA检测培养物上清中IgM含量。结果:SLE患者血清中可溶型FcγRIIb浓度低于正常人(P<0.05);诱导表达并纯化获得相对分子质量(Mr)为41 500的重组蛋白;重组可溶型FcγRIIb可以与血清中免疫复合物结合,二者孵育后吸光度(A)值随血清中免疫复合物浓度逐渐增高,至受体结合度饱和时达最大;不同刺激条件下B细胞培养10 d,各实验组抗体浓度均高于细胞对照组(P<0.01),SPA组、SPA+husFcγRIIb组抗体浓度无显著差异(P﹥0.05),SPA+IgG型抗人IgM组抗体滴度明显高于SPA组(P<0.01),SPA+husFcγRIIb+IgG型抗人IgM组抗体滴度明显低于SPA+IgG型抗人IgM组(P<0.01)、SPA组(P<0.01)和SPA+husFcγRIIb组(P<0.01)。结论:SLE患者血清中可溶性FcγRIIb含量低于正常人,重组人可溶性FcγRIIb可以与血清中免疫复合物结合,抑制免疫复合物对B淋巴细胞的激活,减少IgM型抗体的分泌。
|
关 键 词: | FcγRIIb 可溶性 结合力 抗体分泌 |
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录! |
|