纤维蛋白(原)对人血管平滑肌细胞增殖和移行的影响

目的　观察纤维蛋白原 (Fg)、纤维蛋白 (Fb)及其降解产物 (FDPs)对体外人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和移行的影响 ,探讨凝血 纤溶系统中的产物在再狭窄过程中的作用。方法　 (1)用凝血酶转化Fg制备Fb ,纤溶酶降解Fb制备FDPs并按不同倍数稀释用于实验 ;(2 )传代VSMC 2～ 3d铺满后 ,饥饿培养 2 4h同步化 ,继而进行干预实验 ,2 4孔板VSMC采用细胞计数法测定 ,96孔板VSMC采用四唑盐(MTT)比色实验、BIO -RAD酶联检测仪在 4 90nm波长处测定吸光度 ;(3)刮伤实验观察细胞移行情况 ,同时应用Transwell装置观察细胞的早期移行情况 ;(4 )实验数据以均数±标准差 ( x±s)表示 ,采用统计软件SPSS11.0进行均数t检验。结果　 (1)分别以 0、0 .2、0 .4、0 .8、1.6和 3.2mg/ml浓度的Fg作用于VSMC(每个计量组 6孔 ) ,培养 4 8h后细胞计数显示 ,各浓度Fg对VSMC无促增殖作用 ,而 0 .8mg/ml以上浓度Fg对VSMC的生长抑制率分别为 38%、5 5 %和 70 % (P <0 .0 5 ) ;同时用MTT法检测各浓度对细胞作用 ,发现较高浓度的细胞抑制率分别为 4 2 %、5 9%和 71% ,显示MTT检测法与细胞计数法有较好的相关性 ;(2 )按以上浓度铺板和凝血酶作用后接种VSMC ,培养 4 8h后细胞计数显示 ,0 .2、0 .8和 3.2mg/ml浓度细胞计数值分别为 (8.33± 0 .5