| 内参基因β-actin质粒标准品的构建 |
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| 引用本文： | 王玉林,史进方,蔡惠芬,樊一笋,顾国浩.内参基因β-actin质粒标准品的构建[J].中国神经再生研究,2008,12(48):9501-9504. |
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| 作者姓名： | 王玉林 史进方 蔡惠芬 樊一笋 顾国浩 |
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| 作者单位： | 苏州大学附属第一医院检验科，江苏省临床免疫学实验室;苏州大学附属第一医院检验科，江苏省临床免疫学实验室;苏州大学附属第一医院检验科，江苏省临床免疫学实验室;苏州大学附属第一医院检验科，江苏省临床免疫学实验室;苏州大学附属第一医院检验科，江苏省临床免疫学实验室 |
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| 摘 要： | 为构建检测内参基因β-actin mRNA表达水平差异的标准品，以成人外周血细胞的总RNA为模板、Random 6 mers为引物反转录合成cDNA，用该cDNA为模板PCR扩增人β-actin基因相应的cDNA片段，构建PMD-18-β-actin重组质粒，鉴定测序后，用荧光定量PCR制作标准曲线。结果外周血提取的总RNA完整性良好，构建的β-actin质粒经PCR扩增后得到一186 bp的清晰条带，测序结果与目的片段完全一致，且质粒的原始浓度为2.39×1013 copies/mL，倍比稀释至2.0×104 copies/mL均能得到良好的标准曲线（R2=1），提示构建β-actin基因荧光定量PCR标准质粒成功。
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| 关 键 词： | β-actin 内参基因 荧光定量PCR |
Plasmid construction of reference gene beta-actin |
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| Wang Yu-lin,Shi Jin-fang,Cai Hui-fen,Fan Yi-sun and Gu Guo-hao.Plasmid construction of reference gene beta-actin[J].Neural Regeneration Research,2008,12(48):9501-9504. |
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| Authors: | Wang Yu-lin Shi Jin-fang Cai Hui-fen Fan Yi-sun and Gu Guo-hao |
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| Institution: | Department of Clinical Laboratory, First Affiliated Hospital, Soochow University, Jiangsu Provincial Laboratory of Clinical Immunology;Department of Clinical Laboratory, First Affiliated Hospital, Soochow University, Jiangsu Provincial Laboratory of Clinical Immunology;Department of Clinical Laboratory, First Affiliated Hospital, Soochow University, Jiangsu Provincial Laboratory of Clinical Immunology;Department of Clinical Laboratory, First Affiliated Hospital, Soochow University, Jiangsu Provincial Laboratory of Clinical Immunology;Department of Clinical Laboratory, First Affiliated Hospital, Soochow University, Jiangsu Provincial Laboratory of Clinical Immunology |
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