| 破骨细胞三维培养体系的建立 |
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| 引用本文： | 肖新华,廖二元,董源媛,赵向,刘江华,曹仁贤,文格波. 破骨细胞三维培养体系的建立[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2008, 12(20): 3863-3866 |
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| 作者姓名： | 肖新华 廖二元 董源媛 赵向 刘江华 曹仁贤 文格波 |
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| 作者单位： | 1. 南华大学附属第一医院内分泌科,湖南省衡阳市,421001
2. 中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所,湖南省长沙市,410013 |
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| 基金项目： | 湖南省自然科学基金 , 湖南省卫生厅科研项目 |
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| 摘 要： | 背景:建立基质细胞与骨髓细胞共培养模型能诱导破骨样细胞产生,但这种培养体系存在细胞不单纯,不适合基因转染等缺点.目的:建立基质细胞MBA-1细胞与破骨前体细胞RAW264.7共培养形成不混杂基质细胞的成熟多核破骨细胞的新方法.设计、时间及地点:开放性实验,于2006-10/2007-03在南华大学附属第一医院临床研究所实验室完成.材料:小鼠源性破骨前体细胞RAW264.7细胞从ATCC引进,基质细胞MBA-1细胞由周厚德博士惠赠.方法:RAW264.7细胞以1×104/孔接种于Transwell三维培养板下层,将聚碳酸酯膜孔径0.4μm的培养板上层先取出接种MBA-1细胞,待细胞贴壁胞体伸展后,将其重新与下层联合共培养,共培养体系细胞每3d换液1次.主要观察指标:①抗酒石酸酸性磷酸酶染色法观察染色阳性的破骨细胞形态特点.②扫描电镜观察骨吸收陷窝形态,评价共培养形成的破骨样细胞骨吸收活性.结果:共培养体系中的RAW264.7细胞,第9天可见较多TRAP阳性单核细胞,出现TRAP阳性多核破骨样细胞.共培养14d后,已分化成熟的破骨细胞,能形成骨吸收陷窝.结论:MBA-1细胞与破骨前体细胞RAW264.7分层共培养可形成成熟的、有骨吸收功能的多核破骨细胞,且这种破骨细胞中不混杂基质细胞.
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| 关 键 词： | 破骨细胞 共培养 基质细胞 组织构建 破骨细胞 三维培养体系 osteoclasts system 吸收功能 单核细胞 TRAP 结果 吸收活性 评价 形态特点 吸收陷窝 扫描电镜观察 阳性 染色法 抗酒石酸酸性磷酸酶 观察指标 共培养体系 胞体 膜孔径 |
| 文章编号： | 1673-8225(2008)20-03863-04 |
| 修稿时间： | 2008-01-19 |
Three-dimensional coculture system for osteoclasts |
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| Xiao Xin-hua,Liao Er-yuan,Dong Yuan-yuan,Zhao Xiang,Liu Jiang-hua,Cao Ren-xian,Wen Ge-bo. Three-dimensional coculture system for osteoclasts[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2008, 12(20): 3863-3866 |
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| Authors: | Xiao Xin-hua Liao Er-yuan Dong Yuan-yuan Zhao Xiang Liu Jiang-hua Cao Ren-xian Wen Ge-bo |
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