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共表达EGFP和CXCR4的大鼠骨髓间充质干细胞的构建及其迁移能力
引用本文:俞晓岚,张志坚,吴秀丽,黄志新. 共表达EGFP和CXCR4的大鼠骨髓间充质干细胞的构建及其迁移能力[J]. 基础医学与临床, 2010, 30(7): 737-742
作者姓名:俞晓岚  张志坚  吴秀丽  黄志新
作者单位:1. 福建医科大学,附属第一医院神经病学研究所,福建,福州,350005
2. 福建医科大学,附属第一医院神经病学研究所,福建,福州,350005;福建医科大学,附属第一医院神经内科,福建,福州,350005
基金项目:卫生部科学研究基金-福建省卫生教育联合攻关计划项目,福建省卫生厅医学创新项目
摘    要:
目的 构建携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)及CXCR4慢病毒载体并实现其在大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)中的表达,观察转CXCR4基因后对rMSCs迁移能力的影响。方法 RT-PCR扩增大鼠CXCR4编码区片段,将其插入慢病毒载体质粒PNL-IRES2-EGFP,获得的PNL-CXCR4-IRES2-EGFP与包装及包膜质粒用脂质体法共转染293T细胞,包装生产慢病毒。所获慢病毒转染rMSCs后,用RT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光组织化学和流式细胞术检测转CXCR4基因rMSCs组、转空载体rMSCs组中CXCR4表达情况。利用Transwell方法检测两组rMSCs在SDF-1作用下的迁移能力。结果 双酶切和测序证实,PNL-CXCR4-IRES2- EGFP构建正确,转CXCR4基因rMSCs组CXCR4表达明显增多,在SDF-1α作用下迁移能力明显增强。结论 成功构建带有EGFP和大鼠CXCR4的慢病毒载体,并获得CXCR4-rMSCs基因工程细胞,为深入研究SDF/CXCR4轴在rMSCs向损伤组织定向迁移中的作用奠定了基础。

关 键 词:CXCR4  EGFP  慢病毒  骨髓间充质干细胞  迁移
收稿时间:2009-11-25
修稿时间:2010-03-29

Construction and migration of rat bone marrow mesenchymal stem cells coexpressing EGFP and CXCR4
YU Xiao-lan,ZHANG Zhi-jian,WU Xiu-li,HUANG Zhi-xin. Construction and migration of rat bone marrow mesenchymal stem cells coexpressing EGFP and CXCR4[J]. Basic Medical Sciences and Clinics, 2010, 30(7): 737-742
Authors:YU Xiao-lan  ZHANG Zhi-jian  WU Xiu-li  HUANG Zhi-xin
Abstract:
Keywords:CXCR4  EGFP
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