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RNAi抑制类风湿关节炎成纤维细胞环氧合酶-2合成及对炎症因子的影响
引用本文:姜林娣,王汉洲,赵风娣,薛如意,郭津生,鲍春德,王吉耀. RNAi抑制类风湿关节炎成纤维细胞环氧合酶-2合成及对炎症因子的影响[J]. 中华风湿病学杂志, 2007, 11(5): 275-279
作者姓名:姜林娣  王汉洲  赵风娣  薛如意  郭津生  鲍春德  王吉耀
作者单位:1. 200032,上海,复旦大学附属中山医院风湿科复旦大学风湿免疫过敏中心
2. 200032,上海,复旦大学基因中心
3. 200032,上海,复旦大学上海医学院生理与病理生理学系
4. 200032,上海,复旦大学附属中山医院内科
5. 200032,上海,上海交通大学附属仁济医院风湿科
摘    要:目的体外合成和筛选特异性阻断人滑膜成纤维细胞(RASF)环氧合酶-2(hCOX-2)的小分子干扰RNA(siRNA),同时了解COX-2抑制对炎症因子表达水平的影响。方法设计4条针对人COX-2mRNA siRNA(1#-4#siRNA),1条随机序列作为对照。分成A~H组,A组为空白阴性对照,B~F组处理依次为随机siRNA、1#-4#siRNA。应用LipofectAMINE 2000将上述siRNA转染入RASF,各培养孔加入100nmol/L的佛波酯。转染48h后,分别应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western Blot检测hCOX-2mRNA和蛋白表达水平。采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测各组上清液中前列腺素E2(PGE2)和白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果4#siRNA转染的RASF表达hCOX-2mRNA和蛋白水平明显低于其他siRNA干预组和阴性对照,且其上清液PGE2和IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF水平较其他各组明显下降。结论4#siRNA能有效抑制COX-2mRNA表达和COX-2蛋白的合成,且上清液中PGE2和IL-1β、IL-6、TNF-α及VEGF水平最低。

关 键 词:关节炎  类风湿 环氧化酶 成纤维细胞 前列腺素E2 RNA干扰
收稿时间:2006-10-13

Effect of RNAi on the expression of COX-2 in human rheumatoid arthritis synovial fibroblasts
JIANG Lin-di,WANG Han-zhou,ZHAO Feng-di,XUE Ru-yi,GUO Jin-sheng,BAO Chun-de,WANG Ji-yao. Effect of RNAi on the expression of COX-2 in human rheumatoid arthritis synovial fibroblasts[J]. Chinese Journal of Rheumatology, 2007, 11(5): 275-279
Authors:JIANG Lin-di  WANG Han-zhou  ZHAO Feng-di  XUE Ru-yi  GUO Jin-sheng  BAO Chun-de  WANG Ji-yao
Abstract:
Keywords:Arthritis rheumatoid   Cyclooxygenase   Fibroblasts   Prostaglandin E2   RNA interfering
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