| 摘 要： | 目的 研究SFTS病毒（SFTS virus,SFTSV）的非结构蛋白（Nonstructural proteins,NSs）重组质粒的体液免疫原性.方法 利用聚合酶链反应法（Polymerase chain reaction,PCR）构建真核表达质粒pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-NSs-Flag;引入Nhe Ⅰ酶切位点及tPA（Tissue plasminogen activator,tPA）信号肽,构建质粒pJW4303-tPA-NSs-opt.将质粒转染至HEK 293T细胞,蛋白质印迹法（Western blot,WB）验证NSs表达.NSs相关质粒免疫BALB/c小鼠,采用酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测SFTSV NSs特异性IgG抗体.结果 成功构建了重组NSs质粒,WB验证了NSs可在HEK293T细胞内表达.pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-tPA-NSs-opt重组质粒均可诱导小鼠体内产生特异性IgG,其中单优化型质粒pJW4303-NSs-opt的免疫原性较好,在第6、8周的IgG水平显著高于野生型NSs质粒,差异具有统计学意义.结论 本研究构建的SFTSV的NSs重组优化型质粒具有良好体液免疫原性,其中单优化型效果最佳.
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