| 人重组蛋白P311的原核表达纯化与鉴定 |
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| 引用本文： | 谭江琳,袁顺宗,彭旭,马兵,罗高兴,吴军.人重组蛋白P311的原核表达纯化与鉴定[J].第三军医大学学报,2008,30(1):19-22. |
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| 作者姓名： | 谭江琳 袁顺宗 彭旭 马兵 罗高兴 吴军 |
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| 作者单位： | 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,创伤,烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，重庆市自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 原核表达人增生性瘢痕新候选相关蛋白P311,并对该重组蛋白进行纯化、鉴定.方法 通过PCR方法扩增人P311基因,利用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点将其克隆至谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-s-transferase,GST)融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-β-D-5-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,用SDS-PAGE、Western blotting等方法鉴定表达产物,并用谷胱甘肽-琼脂糖小珠亲和纯化表达的GST-P311蛋白.结果 重组载体pGEX-4T-P311经酶切与测序鉴定证实构建成功.导入大肠杆菌进行表达,表达产物相对分子量为34KD左右,与预期值相符.该条带经免疫印迹检测鉴定为GST抗体阳性,获得了纯化的GST-P311蛋白.结论 构建了pGEX-4T-P311原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,亲和纯化获得较高纯度的GST融合蛋白,为下一步继续研究P311的生物学功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | 原核表达 增生性瘢痕 |
| 文章编号： | 1000-5404（2008）01-0019-04 |
| 收稿时间： | 2007-03-28 |
| 修稿时间： | 2007-09-20 |
Prokaryotic expression, purification and identification of human P311 protein |
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| TAN Jiang-lin,YUAN Shun-zong,PENG Xu,MA Bing,LUO Gao-xing,WU Jun.Prokaryotic expression, purification and identification of human P311 protein[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2008,30(1):19-22. |
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| Authors: | TAN Jiang-lin YUAN Shun-zong PENG Xu MA Bing LUO Gao-xing WU Jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | P311 |
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