| 大鼠GLUT1真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 李方成,李军亮,刘然义,吴中华,张培峰,刘安民.大鼠GLUT1真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达[J].中国病理生理杂志,2005,21(10):1994-1998. |
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| 作者姓名： | 李方成 李军亮 刘然义 吴中华 张培峰 刘安民 |
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| 作者单位： | 1中山大学附属第二医院神经外科，2中山大学肿瘤防治中心实验室， 广东 广州 510120 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(No．39900048)，广东省自然科学基金资助项目(No．010721) |
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| 摘 要： | 目的：构建大鼠葡萄糖转运体1（GLUT1）的真核表达载体。 方法： 以RT-PCR方法从大鼠脑组织中获取GLUT1全长cDNA片段，将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+)中，构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Glut1，随后用lipofectamineTM 2000介导转染HEK293细胞，以RT-PCR法检测重组质粒在mRNA水平的表达，以免疫组化的方法检测重组质粒在蛋白水平的表达。 结果： 以构建的重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Glut1转染293细胞后，在基因及蛋白表达水平均检测到了葡萄糖转运体1的表达。 结论： 成功构建了携带大鼠葡萄糖转运体1的真核表达载体pcDNA3.1(+)-Glut1，且证实其可在293细胞中成功表达目的基因，为进一步研究外源性GLUT1表达对缺血缺氧脑细胞的保护作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 葡萄糖转运体1 真核表达 脑缺血 293细胞 免疫组织化学 |
| 文章编号： | 1000-4718（2005）10-1994-05 |
| 收稿时间： | 2005-06-25 |
| 修稿时间： | 2005-07-18 |
Construction of eukaryotic expression vector carrying rat GLUT1 gene and its expression in 293 cells |
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| LI Fang-cheng,LI Jun-liang,LIU Ran-yi,WU Zhong-hua,ZHANG Pei-feng,LIU An-min.Construction of eukaryotic expression vector carrying rat GLUT1 gene and its expression in 293 cells[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2005,21(10):1994-1998. |
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| Authors: | LI Fang-cheng LI Jun-liang LIU Ran-yi WU Zhong-hua ZHANG Pei-feng LIU An-min |
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| Institution: | 1Department of Neurosurgery, The Second Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510120, China;2The Central Laboratory of Sun Yat-sen University Cancer Center, Guangzhou 510060, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Glucose transporter-1 Eukaryotic expression Brain ischemia 293 cells Immunohistochemistry |
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