卡巴胆碱对人视网膜色素上皮细胞转化生长因子β_2表达的调控

目的研究卡巴胆碱对人视网膜色素上皮（RPE）细胞株D407表达转化生长因子β2（TGF-β2）的调控,进而阐明胆碱能药物在近视眼巩膜重塑中的作用。方法常规培养D407细胞,药物干预前换用无血清培养基培养24h。将传代细胞分为实验组和空白组,实验组分别加入1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L卡巴胆碱,空白组不加药物。于处理后2、4、8、16、24、48h分别采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Westernblot法检测细胞中TGF-β2mRNA及TGF-β2蛋白的表达,分析时效与量效关系。结果空白组细胞TGF-β2mRNA、蛋白质表达水平恒定。实验组D407细胞中TGF-β2mRNA的表达随卡巴胆碱作用时间的延长而逐渐升高,差异有统计学意义（F=4455.148,P〈0.01）;且随卡巴胆碱浓度的升高逐渐增加,各组的总体比较差异有统计学意义（F=1102.240,P〈0.01）。卡巴胆碱浓度与干预时间对TGF-β2mRNA表达的影响存在交互作用（F=249.609,P〈0.01）。实验组D407细胞中TGF-β2蛋白的表达随时间延长而逐渐升高,各时间点的总体比较差异有统计学意义（F=2619.21,P〈0.01）,不同浓度卡巴胆碱组TGF-β2蛋白的表达总体比较差异有统计学意义（F=2918.62,P〈0.01）,卡巴胆碱浓度与干预时相TGF-β2蛋白表达的影响存在交互作用（F=186.02,P〈0.01）。结论 RPE细胞可表达TGF-β2,卡巴胆碱可以浓度和时间依赖的方式调控RPE细胞中TGF-β2的表达。