人B7-2(CD86) IgV+C段高效原核表达及活性测定 |
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引用本文: | 闫晓彩,司履生,王一理,来宝长,耿宜萍. 人B7-2(CD86) IgV+C段高效原核表达及活性测定[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2002, 22(2): 131-133 |
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作者姓名: | 闫晓彩 司履生 王一理 来宝长 耿宜萍 |
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作者单位: | 1. 西安交通大学第一医院儿科 2. 西安交通大学医学院免疫病理研究室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(39470293) |
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摘 要: | 目的克隆、表达B7-2(IgV+C)并进行体外功能测定.方法用聚合酶链反应(PCR)技术从B7-2 cDNA中克隆B7-2(IgV+C),在此基础上构建表达B7-2(IgV+C)的原核表达载体pGEX-4T-3/hB7-2(IgV+C);SDS-PAGE检测蛋白表达,蛋白经变性、复性后在体外协同抗CD3单抗刺激人T细胞,3H-TdR掺入法检测T细胞的活化程度.结果在原核表达载体中成功地克隆了B7-2(IgV+C),SDS-PAGE表明在相对分子质量(Mr)55×103处有hB7-2(IgV+C)/GST融合蛋白的高效表达,其表达量占菌体总蛋白的33%.体外实验证明,此融合蛋白可协同抗CD3单抗刺激人T细胞活化.结论重组蛋白B7-2(IgV+C)在第一信号存在下可活化T细胞,即具有共刺激活性.
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关 键 词: | B7-2分子 共刺激 基因表达 融合蛋白 聚合酶链反应 原核表达 T细胞 |
修稿时间: | 2000-12-25 |
Prokaryotic high-level expression and activity assay of extracellular domain of B7-2 (CD86) in vitro |
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Abstract: | |
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Keywords: | B7-2(CD86) Costimulation Gene expression Fusion protein |
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