| 人Mad2基因正义真核表达质粒的构建及其对人卵巢癌细胞A2780紫杉醇敏感性的影响 |
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| 引用本文： | 郝星,叶双梅,周志刚,周婷,卢运萍,王世宣. 人Mad2基因正义真核表达质粒的构建及其对人卵巢癌细胞A2780紫杉醇敏感性的影响[J]. 中国癌症杂志, 2010, 20(10) |
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| 作者姓名： | 郝星 叶双梅 周志刚 周婷 卢运萍 王世宣 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,湖北,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家海外青年学者合作研究基金项目，国家973重点基础研究发展计划资助项目，教育部科学技术研究重点项目立项项目 |
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| 摘 要： | 背景与目的:紫杉醇是一种高效广谱的抗肿瘤药物,已常规应用于卵巢癌的化疗.但近年来随着耐药的发生,紫杉醇耐药已成为影响肿瘤化疗预后的主要难题,有研究显示紫杉醇药效的发挥与纺锤体检测点功能完整性相关.本研究通过构建人纺锤体检测点蛋白Mad2基因正义真核表达质粒,旨在探讨Mad2蛋白对人卵巢癌A2780细胞株紫杉醇敏感性的影响.方法:构建pEGFP-Mad2正义表达质粒,通过脂质体LipofectamineTM2000将其转入体外培养的人卵巢癌细胞株A2780中,应用RT-PCR、Western blot等方法分析相关基因和蛋白水平的变化情况;通过流式细胞术比较稳筛细胞对紫杉醇敏感性的改变情况.结果:成功构建了pEGFP-Mad2正义表达质粒;并筛选出稳定高表达Mad2的细胞株.RT-PCR、Western blot检测均显示稳定筛出的pEGFP-Mad2/A2780细胞株中Mad2呈高表达.流式细胞术检测结果显示,紫杉醇作用24或48 h后,对照组pEGFP-N1/A2780的细胞凋亡率分别为12.34%和58.76%,而pEGFP-Mad2/A2780组细胞凋亡率则分别为27.32%和87.53%,差异有统计学意义(P<0.05).结论:pEGFP-Mad2正义表达质粒能够有效上调A2780细胞中Mad2基因mRNA和蛋白的表达,并增加人卵巢癌细胞A2780对紫杉醇化疗的敏感性.
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| 关 键 词： | 卵巢癌 紫杉醇 耐药 Mad2基因 |
Construction of human Mad2 sense eukaryotic expression vector and its effect on the sensitivity to paclitaxel in human ovarian cancer cell line A2780 |
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| HAO Xing,YE Shuang-mei,ZHOU Zhi-gang,ZHOU Ting,LU Yun-ping,WANG Shi-xuan. Construction of human Mad2 sense eukaryotic expression vector and its effect on the sensitivity to paclitaxel in human ovarian cancer cell line A2780[J]. China Oncology, 2010, 20(10) |
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| Authors: | HAO Xing YE Shuang-mei ZHOU Zhi-gang ZHOU Ting LU Yun-ping WANG Shi-xuan |
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