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DNA甲基转移酶1基因沉默对HT-29细胞凋亡的影响
引用本文:王居峰,刘莺,刘文静,何素英.DNA甲基转移酶1基因沉默对HT-29细胞凋亡的影响[J].郑州大学学报(医学版),2010,45(5).
作者姓名:王居峰  刘莺  刘文静  何素英
作者单位:河南省肿瘤医院肿瘤内科,郑州,450003
基金项目:中国临床肿瘤学科基金资助项目
摘    要:目的:观察DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因沉默对结肠癌HT-29细胞凋亡的影响.方法:HT-29细胞分为3组:未处理组、对照siRNA组及DNMT1 siRNA组,后2细胞转染对照siRNA和DNMT1 siRNA,24 h后,通过RT-PCR和Western blot观察3组细胞DNMT1、Caspase-3/9、bcl-2及Bax mRNA和蛋白表达的变化,通过流式细胞术分析HT-29细胞凋亡,并测定Caspase-3/9的活性.结果:DNMT1 siRNA组中DNMT1 mRNA和蛋白的相对表达量为(0.273±0.016)和(1.127±0.019),低于未处理组分别为(1.729±0.023)和(2.741±0.031)]和对照siRNA组分别为(1.751±0.018)和(2.673±0.027)](F分别为5822.683和3656.560,P均<0.001).DNMT1 siRNA组细胞凋亡率为(22.65%±1.67%),高于未处理组(7.92%±1.29%)和对照siRNA组(8.13%±1.21%)(F=108.460,P<0.001).DNMT1 siRNA组细胞的Caspase-3/9活性分别为(2671.83±57.63)和(2187.71±68.35)]高于未处理组(196.47±16.73)和(511.35±34.90)]和对照siRNA组(215.29±14.38)和(534.78±41.70)](F分别为4790.975和1089.891,P均<0.001).与未处理组和对照组相比DNMT1 siRNA组Bcl-2 mR-NA和蛋白的表达降低,但Caspase-3/9和Bax mRNA和蛋白的表达升高(P<0.05).结论:DNMT1的下调能诱导HT-29细胞凋亡,其可能的作用机制与caspase-3/9、bcl-2和bax表达的变化密切相关.

关 键 词:DNA甲基转移酶1  结肠癌  HT-29细胞  细胞凋亡  基因沉默

Effects of knock-down of DNMT1 gene on apoptosis in HT-29 cells
WANG Jufeng , LIU Ying , LIU Wenjing , HE Suying.Effects of knock-down of DNMT1 gene on apoptosis in HT-29 cells[J].Journal of Zhengzhou University: Med Sci,2010,45(5).
Authors:WANG Jufeng  LIU Ying  LIU Wenjing  HE Suying
Abstract:
Keywords:
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