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脐带源间充质干细胞的分离和生物学性状
引用本文:吕璐璐,刘拥军,许贞书,王彤,张浪辉,朱雄鹏,梁琳慧,王晗,陈志哲,韩忠朝. 脐带源间充质干细胞的分离和生物学性状[J]. 福建医科大学学报, 2006, 40(2): 99-104
作者姓名:吕璐璐  刘拥军  许贞书  王彤  张浪辉  朱雄鹏  梁琳慧  王晗  陈志哲  韩忠朝
作者单位:1. 福建医科大学,附属协和医院、福建省血液病研究所,福州,350001;泰达国家干细胞中心,中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所,天津,300020
2. 泰达国家干细胞中心,中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所,天津,300020
3. 福建医科大学,附属协和医院、福建省血液病研究所,福州,350001
基金项目:国家科技攻关项目;科技部科研项目;中国科学院资助项目
摘    要:目的建立从脐带分离间充质干细胞的方法,并研究其生物学性状。方法脐带经酶消化后于DMEMLG/F12培养基中培养,倒置显微镜及电镜观察细胞形态学,细胞计数绘制细胞生长曲线,计数成纤维细胞集落形成单位(CFUF),流式细胞仪测定细胞周期及细胞免疫表型,免疫组织化学染色及RTPCR检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力,RTPCR检测其细胞因子的分泌,与脐血来源CD34+细胞共同培养检测其支持造血的能力。结果经酶消化后,每cm脐带可得到中位数为1.01×106的有核细胞,CFUF产率为1/1609有核细胞,经贴壁传代可分离出成纤维样细胞,细胞倍增时间为(28.02±10.53)h。流式细胞仪分析细胞周期显示,>80%的细胞处于G0/G1期,S+G2+M期的细胞仅占(13.04±4.31)%。免疫表型分析显示,CD13、CD29、CD44、CD105(SH2)、CD73(SH3)、CD166和MHCI阳性,CD45、CD34、CD38、CD31和MHCⅡ阴性。体外诱导实验证实,该细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。RTPCR显示,该细胞表达干细胞因子、血小板生成素,酪氨酸激酶受体配基、白细胞介素6、巨噬细胞集落刺激因子、白血病抑制因子、基质细胞衍生因子和血管内皮细胞生长因子,不表达白细胞介素3。与脐血来源CD34+细胞共同培养2周可见鹅卵石形成区,共培养8周证实其支持长期造血能力。结论建立从脐带中分离间充质干细胞的方法,脐带是间充质干细胞的新的来源。

关 键 词:间充质干细胞  脐带  多能干细胞
文章编号:1672-4194(2006)02-0099-06
收稿时间:2006-01-25
修稿时间:2006-01-252006-02-13

Isolation and Biological Characteristics of Mesenchymal Stem Cells from Umbilical Cord
Lu Lulu,Liu Yongjun,Xu Zhenshu,Wang Tong,Zhang Langhui,Zhu Xiongpeng,Liang Linhui,Wang Han,Chen Zhizhe,Han Zhongchao. Isolation and Biological Characteristics of Mesenchymal Stem Cells from Umbilical Cord[J]. Journal of Fujian Medical University, 2006, 40(2): 99-104
Authors:Lu Lulu  Liu Yongjun  Xu Zhenshu  Wang Tong  Zhang Langhui  Zhu Xiongpeng  Liang Linhui  Wang Han  Chen Zhizhe  Han Zhongchao
Abstract:
Keywords:mesenchymal stem cells   umbilical cord   osteoblasts   cells separation
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