| 抗人有机阴离子转运蛋白3抗体制备及其在肾脏定位的研究 |
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| 引用本文： | 张萍,陈香美,许国双,何娅妮,吴镝,杨聚荣. 抗人有机阴离子转运蛋白3抗体制备及其在肾脏定位的研究[J]. 第三军医大学学报, 2006, 28(23): 2333-2335 |
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| 作者姓名： | 张萍 陈香美 许国双 何娅妮 吴镝 杨聚荣 |
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| 作者单位： | 第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾内科,重庆400042;中国人民解放军总医院肾科,中国人民解放军肾病中心暨重点实验室,北京,100853 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家自然科学基金，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 采用新的基因免疫方法制备小鼠抗人有机阴离子转运蛋白3(anti-human organicanion transporter 3,hOAT3)多克隆抗体,并用该抗体对hOAT3在人肾小管上皮细胞的表达进行定位研究.方法 应用Accelrys软件分析hOAT3抗原表位,选择其细胞内表位,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法从人肾组织RNA中扩增其261 bp的cDNA序列,克隆到pBQAP-TT构建基因免疫载体,与辅助载体pCMVi-GMCSF和pCMVi-FIT3L同时免疫小鼠,5周后获得血清抗体,人肾组织Western blot和免疫组化鉴定抗体的特异性和定位表达.结果 成功构建基因免疫载体pBQAP-TT-hOAT3,序列分析鉴定正确,ELISA方法测得抗体滴度高达1∶3 000,该抗体识别人肾皮质膜蛋白62×103的hOAT3,人肾组织免疫组化提示该抗体识别定位在肾小管上皮细胞基底膜.结论 成功用基因免疫方法制备高效特异性抗hOAT3多克隆抗体,为今后的生理病理研究奠定基础.
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| 关 键 词： | 肾脏 有机阴离子转运蛋白3 基因免疫 抗体制备 |
| 文章编号： | 1000-5404（2006）23-2333-03 |
| 收稿时间： | 2006-06-26 |
| 修稿时间： | 2006-10-30 |
Preparation of mouse anti-human organicanion transporter 3 polyclonal antibodies by genetic immunization and the protein's localization in the kidney |
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| ZHANG Ping,CHEN Xiang-mei,XUN Guo-shuang,HE Yani,WU Di,YANG Ju-rong. Preparation of mouse anti-human organicanion transporter 3 polyclonal antibodies by genetic immunization and the protein's localization in the kidney[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2006, 28(23): 2333-2335 |
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| Authors: | ZHANG Ping CHEN Xiang-mei XUN Guo-shuang HE Yani WU Di YANG Ju-rong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | kidneys human organicanion transporter 3 genetic immunization polyclonal antibodies |
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