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基于巨噬细胞吞噬模型的阿胶品质生物评价方法构建
引用本文:刘靖,郝俊杰,刘士敬,肖小河,牛明.基于巨噬细胞吞噬模型的阿胶品质生物评价方法构建[J].中国现代中药,2019,21(6):771-776.
作者姓名:刘靖  郝俊杰  刘士敬  肖小河  牛明
作者单位:承德医学院,河北承德067000,中国人民解放军总医院 第五医学中心 全军中医药研究所,北京100039,中国人民解放军总医院 第五医学中心 全军中医药研究所,北京100039,中国人民解放军总医院 第五医学中心 全军中医药研究所,北京100039,中国人民解放军总医院 第五医学中心 全军中医药研究所,北京100039
基金项目:国家重点研发计划专项(2018YFC1707000);国家中药标准化项目(ZYBZH-Y-BJ-07,ZYBZH-Y-TJ-43,ZYBZH-C-HUN-21)
摘    要:目的:建立基于小鼠巨噬细胞系RAW 264.7吞噬模型的阿胶生物活性评价方法。方法:采用CCK-8法考察细胞密度、孵育时间以及阿胶对巨噬细胞增殖活性的影响,确定合适的阿胶给药浓度。采用高内涵结合荧光成像技术,通过考察其感染复数(multiplicity of infection,MOI,MOI=细菌数/细胞数)、给药剂量等影响因素,分析阿胶影响巨噬细胞的整体吞噬率及单个细胞吞噬指数。结果:确定最佳检测方法,即给药时间为24 h、MOI值为200倍、细菌刺激时间为2 h。与Control组相比,在阿胶质量浓度为0.125~2.0 mg·mL~(-1)时,可促进巨噬细胞的增殖,在0.5 mg·mL~(-1)时阿胶促进巨噬细胞的增殖能力达到最强;在阿胶质量浓度为0.25~1.0 mg·mL~(-1)时,对单个细胞的吞噬能力没有明显作用,但是对巨噬细胞的整体吞噬率具有剂量依赖的促进作用,并在0.25 mg·mL~(-1)时阿胶促进巨噬细胞吞噬率的能力达到最强。结论:本研究建立了以巨噬细胞吞噬绿色荧光标记的大肠杆菌(Green Fluorescent Protein-Escherichia coli,GFP-E.coli)为生物模型的高内涵荧光成像筛选技术的阿胶品质评价生物方法,可用于对不同品质阿胶的检测。

关 键 词:阿胶  巨噬细胞  大肠杆菌  吞噬  生物评价
收稿时间:2019/3/23 0:00:00

Biological Evaluation for Quality Control of Asini Corii Colla Based on Macrophage Phagocytosis Model
LIU Jing,HAO Jun-jie,LIU Shi-jing,XIAO Xiao-he and NIU Ming.Biological Evaluation for Quality Control of Asini Corii Colla Based on Macrophage Phagocytosis Model[J].Modern Chinese Medicine,2019,21(6):771-776.
Authors:LIU Jing  HAO Jun-jie  LIU Shi-jing  XIAO Xiao-he and NIU Ming
Abstract:
Keywords:
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