miR-7基因敲减对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响 |
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引用本文: | 陈慧子,郭萌萌,赵娟娟,岳东旭,丁涛,陈超,徐林.miR-7基因敲减对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响[J].现代免疫学,2019(3). |
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作者姓名: | 陈慧子 郭萌萌 赵娟娟 岳东旭 丁涛 陈超 徐林 |
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作者单位: | 贵州省基因检测与治疗特色重点实验室;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省生物治疗人才基地 |
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摘 要: | 观察miR-7基因敲减(knockdown, KD)对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响,并初步探讨其机制。分别用0、50、100、200 ng/mL LPS刺激野生型(wild type, WT)小鼠骨髓来源巨噬细胞12 h,经实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR, Real-time PCR)检测发现,随着LPS刺激浓度的增加,巨噬细胞中miR-7的表达水平逐渐升高,且在100 ng/mL LPS浓度刺激下miR-7表达最显著(P0.01)。用100 ng/mL LPS处理miR-7 KD小鼠和WT小鼠骨髓来源巨噬细胞12 h,镜检观察到巨噬细胞形态均由圆形变为长梭形,并伸出长长的伪足。应用流式细胞术检测巨噬细胞表面CD80和CD86分子的表达情况,结果显示,LPS作用后,miR-7 KD小鼠骨髓来源巨噬细胞表面CD80和CD86的比例较WT小鼠显著上调(P0.05)。Real-time PCR和ELISA结果显示,miR-7 KD小鼠巨噬细胞在LPS刺激后,炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-ɑ的表达显著增加(P0.05)。Western blotting检测结果显示,LPS刺激后,与对照组相比,miR-7 KD小鼠巨噬细胞中NF-κB p65和p-NF-κB p65的蛋白水平显著升高(P0.01)。以上数据显示,miR-7基因KD可显著增强LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,可能与NF-κB信号通路的传递增强有关,提示miR-7在巨噬细胞炎症过程中发挥重要的调控作用。
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关 键 词: | 微小RNA-7 基因敲减 巨噬细胞 炎症 |
Effect of miR-7 knockdown on LPS-induced macrophage inflammation in murine |
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Abstract: | |
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