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内质网应激激活STING信号通路并降低胰岛β细胞活力
作者姓名:彭荣东  何学敏  王瑨  文哲瑶  艾鹤英  朱延华  鲁岩  石国军  陈燕铭
作者单位:1. 中山大学附属第三医院内分泌与代谢病学科广州市肥胖分子机理与转化重点实验室广东省糖尿病防治重点实验室;2. 中山大学附属第三医院临床免疫中心
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.81770826;No.82070811;No.82000782);;中山大学临床研究5010项目(No.2015015);;广州市科技计划项目(No.202007040003);
摘    要:目的:鉴定胰岛β细胞中干扰素基因刺激因子(STING)信号通路相关基因的表达及其与内质网应激的相互作用,研究2个通路间的相互作用对胰岛β细胞活力的影响。方法:通过生物信息学分析来源于人的胰岛单细胞RNA测序数据集,得到STING信号通路相关基因在胰岛β细胞中的表达变化;用免疫荧光法检测并比较野生型小鼠和db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞中STING蛋白的表达差异;用STING特异性激动剂5,6-二甲基呫吨酮-4-乙酸(DMXAA)处理3种常用的小鼠胰岛β细胞系(NIT-1、Min6及beta-TC-6),并通过RT-qPCR和Western blot分别检测其STING信号通路相关蛋白的mRNA和蛋白表达水平变化;用毒胡萝卜素(TG)诱导上述β细胞系内质网应激,通过Western blot检测STING信号通路相关蛋白的表达及磷酸化水平,并通过CCK-8法检测胰岛β细胞活力。结果:人胰岛β细胞中存在STING信号通路主要基因mRNA的表达,但在健康人群和糖尿病患者的表达水平无显著差异。免疫荧光结果表明,野生型小鼠和db/db小鼠胰岛β细胞的STING蛋白均在细胞核周边富集,且在db/db小...

关 键 词:糖尿病  干扰素基因刺激因子  单细胞测序  内质网应激  胰岛β细胞  细胞活力
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