| GnRH/M2融合蛋白致敏DC疫苗对黑色素瘤B16F10细胞移植瘤的抑制 |
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| 引用本文： | 曹荣月,马云菲,袁玉婷,张昕黎,李曼曼,苗梓韬,金亮. GnRH/M2融合蛋白致敏DC疫苗对黑色素瘤B16F10细胞移植瘤的抑制[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2016, 23(4): 468-475. DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2016.04.002 |
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| 作者姓名： | 曹荣月 马云菲 袁玉婷 张昕黎 李曼曼 苗梓韬 金亮 |
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| 作者单位： | 中国药科大学 生命科学与技术学院 微基因药物实验室,江苏南京,210009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（No.81172973，81373232）；大学生创新药物研制能力提高项目（No.J1030830），江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）；江苏省杰出人才引导项目（No. BK20140029） |
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| 摘 要： | 目的:制备促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)与M2的融合蛋白(GnRH/M2),研究由该融合蛋白致敏而成的DC疫苗对黑色素瘤B16F10细胞小鼠移植瘤的抑制作用.方法:构建表达载体pET28a-ansB-C-GnRH3-hinge-MVP-M2质粒,该质粒转化的工程菌在乳糖的诱导下,融合蛋白ansB-C-GnRH3-hinge-MVP-M2以包涵体形式表达,经超声破碎、洗涤和乙醇分级沉淀纯化后,通过酸水解将蛋白多肽GnRH3-hinge-MVP-M2释放出来,并通过DEAE-52阴离子交换层析进行分离.将此融合多肽致敏DC获得DC疫苗.构建黑色素瘤B16F10细胞小鼠移植瘤模型,按接种疫苗不同,分为:环磷酰胺组(CTX)、GnRH/M2融合蛋白致敏DC组(GDC)、肿瘤细胞裂解物致敏DC组(BDC)、GnRH/M2融合蛋白致敏DC+环磷酰胺组(GDCTX)、肿瘤细胞裂解物致敏DC+环磷酰胺组(BDCTX)和生理盐水组(NS),观察GnRH/M2疫苗对模型小鼠的移植瘤生长、CTL杀伤能力和T细胞增殖的作用.结果:成功构建pET28a-ansB-C-GnRH3-hinge-MVP-M2质粒并高效表达融合蛋白.GDC组移植瘤生长明显慢于NS组(P＜0.05),且与BDC组相似(P ＞0.05);GDCTX组抑瘤效果虽进一步提高,但与CTX组相比差异无统计学意义(P＞0.05).各实验组对B16F10细胞的杀伤作用和对T细胞增殖作用均优于阴性对照组(P ＜0.05或P＜0.01),且GDC组与BDC组间差异不显著(P＞0.05).结论:初步证明融合多肽GnRH/M2致敏的DC疫苗能有效抑制黑色素瘤B16F10细胞小鼠移植瘤的生长.
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| 关 键 词： | 促性腺激素释放激素 树突状细胞 B16F10细胞 黑色素瘤 融合蛋白 |
| 收稿时间： | 2016-03-26 |
| 修稿时间： | 2016-05-24 |
Inhibitory effect of DC vaccine sensitized by GnRH/M2 fusion protein on melanoma B16F10 cell xenografts |
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| CAO Rongyue,MA Yunfei,YUAN Yuting,ZHANG Xinli,LI Manman,MIAO Zitao and JIN Liang. Inhibitory effect of DC vaccine sensitized by GnRH/M2 fusion protein on melanoma B16F10 cell xenografts[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2016, 23(4): 468-475. DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2016.04.002 |
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| Authors: | CAO Rongyue MA Yunfei YUAN Yuting ZHANG Xinli LI Manman MIAO Zitao JIN Liang |
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| Affiliation: | CAO Rongyue;MA Yunfei;YUAN Yuting;ZHANG Xinli;LI Manman;MIAO Zitao;JIN Liang;Laboratory of Minigene Pharmacy,School of Life Science and Technology,Pharmaceutical University of China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gonadotropin releasing hormone (GnRH) dendritic cell (DC) B16F10 cell melanoma fusion protein |
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