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shRNA沉默PLCε基因表达对肾癌细胞增殖的抑制及作用机制
引用本文:谢建红,罗春丽,郭永灿,冀慧莹,吕纯芳,苟春华. shRNA沉默PLCε基因表达对肾癌细胞增殖的抑制及作用机制[J]. 肿瘤, 2008, 28(11). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2008.11.002
作者姓名:谢建红  罗春丽  郭永灿  冀慧莹  吕纯芳  苟春华
作者单位:重庆医科大学检验系,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016
摘    要:目的:探讨经短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默磷脂酶Cε(phospholipase C epsilon,PLCε)基因表达后对肾癌786-0细胞增殖的抑制及其作用机制.方法:脂质体介导重组质粒(pGenesil-PLCε)和空质粒(pGenesil-NP)转染786-0细胞48 h后,RT-PCR检测PLCε mRNA的表达;MTT法检测转染24、48和72 h后细胞增殖的抑制率;转染48 h后采用FCM方法分析细胞周期;RT-PCR和免疫细胞化学法分析转染48 h后p27和Ki67的表达情况.结果:转染重组质粒后可明显抑制PLCεmRNA的表达,其抑制率为69.7%;转染24、48和72 h后细胞增殖抑制率分别为21.2%,31.6%和32.7%;FCM结果显示转染重组质粒后细胞周期的分布发生了改变,G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞阻滞于G0/G1期,并出现了亚二倍体"凋亡峰".RT-PCR和免疫细胞化学结果均表明p27表达上调,而Ki67表达下调.结论:RNA干扰技术阻断PLCε基因表达后可抑制肾癌786-0细胞增殖,其作用机制可能是诱导p27表达上调和Ki67表达下调.

关 键 词:癌,肾细胞  基因沉默  磷脂酶C  细胞增殖

The inhibitory effect of silencing PLCε gene expression by shRNA on the proliferation of renal carcinoma cells and its action mechanism
XIE Jian-hong,LUO Chun-li,GUO Yong-can,JI Hui-ying,L Chun-fang,XUN Chun-hua. The inhibitory effect of silencing PLCε gene expression by shRNA on the proliferation of renal carcinoma cells and its action mechanism[J]. Tumor, 2008, 28(11). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2008.11.002
Authors:XIE Jian-hong  LUO Chun-li  GUO Yong-can  JI Hui-ying  L Chun-fang  XUN Chun-hua
Affiliation:XIE Jian-hong,LUO Chun-li,GUO Yong-can,JI Hui-ying,L(U) Chun-fang,XUN Chun-hua
Abstract:
Keywords:Carcinoma  renal cell  Genes silencing  Phospholipase C  Cell proliferation  
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