| RNAi沉默整合素连接激酶基因表达对结肠癌细胞HT-29增殖的影响 |
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| 引用本文： | 杨凤武,梁后杰. RNAi沉默整合素连接激酶基因表达对结肠癌细胞HT-29增殖的影响[J]. 临床肿瘤学杂志, 2007, 12(4): 246-250 |
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| 作者姓名： | 杨凤武 梁后杰 |
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| 作者单位： | 400038,重庆,第三军医大学附属西南医院肿瘤科;400038,重庆,第三军医大学附属西南医院肿瘤科 |
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| 摘 要： | 目的:利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,阻断结肠癌细胞系HT-29中整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因的表达,研究ILK基因沉默后对HT-29细胞系增殖产生的影响。方法:构建针对ILK基因的真核表达质粒pSUPER-neo-EGFP-ILK(pSNE-ILK),在脂质体介导下稳定转染人结肠癌细胞系HT-29细胞(HT-29/pSNE-ILK组),同时以无关质粒pSUPER-neo-EGFP-C(pSNE-C)转染HT-29细胞(HT-29/pSNE-C组)和未转染细胞(HT-29组)作为对照,分别应用RT-PCR技术及蛋白印迹法检测ILK mRNA及蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖状况。结果:稳定转染后,HT-29/pSNE-ILK组ILK mRNA及蛋白表达水平分别为0.16±0.11和0.24±0.07,HT-29/pSNE-C组分别为0.53±0.10和0.56±0.08,HT-29组分别为0.64±0.11和0.77±0.02,前组ILK mRNA及蛋白表达水平分别与后两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);稳定转染pSNE-ILK质粒后HT-29细胞中ILK mRNA及蛋白表达抑制率分别为69.8%和57.1%。MTT比色法检测显示,HT-29/pSNE-ILK组细胞增殖率明显下降(P<0.05)。结论:RNA干扰技术能有效抑制靶基因ILK的表达,进而可抑制结肠癌细胞系HT-29的增殖。
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| 关 键 词： | 结肠癌细胞 整合素连接激酶 RNA干扰 稳定转染 |
| 文章编号： | 1009-0460（2007）00-0246-05 |
| 收稿时间： | 2006-12-10 |
| 修稿时间： | 2007-02-14 |
RNA interference silences ILK gene and affects proliferation in HT-29 cells |
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| YANG Feng-wu,LIANG Hou-jie. RNA interference silences ILK gene and affects proliferation in HT-29 cells[J]. Chinese Clinical Oncology, 2007, 12(4): 246-250 |
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| Authors: | YANG Feng-wu LIANG Hou-jie |
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| Affiliation: | YANG Feng-wu,LIANG Hou-jie.Department of Oncology,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Colon carcinoma cells Integrin-linked kinase(ILK) RNA interference Stable transfection |
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