| 十二指肠钩虫天冬氨酸蛋白酶抑制剂的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 张振林,邓莉,杨陈,彭礼飞.十二指肠钩虫天冬氨酸蛋白酶抑制剂的克隆与表达[J].中国热带医学,2009,9(7):1181-1183. |
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| 作者姓名： | 张振林 邓莉 杨陈 彭礼飞 |
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| 作者单位： | 广东医学院寄生虫学教研室,广东,湛江,524023 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金(04011381) |
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| 摘 要： | 目的 克隆并表达十二指肠钩虫天冬氨酸蛋白酶抑制剂（Aa—API-1）。方法根据犬钩虫及锡兰钩虫API保守序列设计引物，RT—PCR扩增获得Ad—API-1完整阅读框序列，并将Ad—API—1成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达载体pET32a，以构建重组表达质粒，转化至大肠杆菌B121（DE3）中用IPTG诱导表达，用Ni亲和层析进行纯化。结果成功克隆获得Ad—API-1完整阅读框序列；构建了pET32a／Ad—API-1重组质粒，Ad—API—1在大肠杆菌中得到了高效表达。结论成功克隆并表达Ad—API—1，为进一步研究Ad—API-1的功能，探讨其作为血清学诊断抗原或保护性疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 十二指肠钩虫 天冬氨酸蛋白酶抑制剂 克隆 表达 |
Cloning and expression of an aspaartyl protease inhibitors(Ad-API-1)from Ancylostoma duodenale |
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| ZHANG Zhen-lin,DENG Li,YANG Chen,et al..Cloning and expression of an aspaartyl protease inhibitors(Ad-API-1)from Ancylostoma duodenale[J].China Tropical Medicine,2009,9(7):1181-1183. |
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| Authors: | ZHANG Zhen-lin DENG Li YANG Chen |
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| Institution: | Department of Parasitology;Guangdong Medical College;Zhanjiang 524023;Guangdong;P.R.China |
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| Abstract: | Objective To clone and express the aspartyl protease inhibitors(Ad-API-1)from Ancylostoma duodenale.Methods The cDNA encoding Ad-API-1 from Ancylostoma duodenale were amplified by RT-PCR.The nucleotide sequence encoding mature Ad-API-1 was ligated into pET32a to construct the recombinant pET32a/Ad-API-1 plasmid.The recombinant Ad-API-1 were expressed in E.coli BL21(DE3) by inducing with IPTG and purified by Ni-Affinity chromatography.Results The Ad-API-1 gene that deposited in GenBank(accession no.EF490131)... |
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| Keywords: | Ancylostoma duodenale Aspartyl protease inhibitor Cloning Expression |
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