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六味地黄丸入血成分增效自杀基因杀伤肝癌细胞的缝隙连接机制
引用本文:刘娟,周瑶,张广献,谭宇蕙,肖建勇,吴映雅,曾玲,杜标炎.六味地黄丸入血成分增效自杀基因杀伤肝癌细胞的缝隙连接机制[J].广州中医药大学学报,2014,31(1).
作者姓名:刘娟  周瑶  张广献  谭宇蕙  肖建勇  吴映雅  曾玲  杜标炎
作者单位:刘娟 (广州中医药大学,广东广州,510006); 周瑶 (湖南中医药高等专科学校形态教研室,湖南株洲,412012); 张广献 (广州中医药大学生化教研室,广东广州,510006); 谭宇蕙 (广州中医药大学生化教研室,广东广州,510006); 肖建勇 (广州中医药大学生化教研室,广东广州,510006); 吴映雅 (广州中医药大学生化教研室,广东广州,510006); 曾玲 (广州中医药大学,广东广州,510006); 杜标炎 (广州中医药大学病理教研室,广东广州,510006);
基金项目:国家自然科学基金资助项目(项目编号:81072906)
摘    要:【目的】探讨六味地黄丸主要入血成分处理的淋巴上清对大鼠肝癌细胞CBRH7919缝隙连接功能的影响,以期阐明其增强自杀基因疗法杀伤肝癌细胞效应的作用机制。【方法】取大鼠脾淋巴细胞,加入六味地黄丸的5种主要入血成分,体外培养后取含药淋巴上清,采用流式细胞术结合荧光示踪法分析其对细胞缝隙连接通讯功能(GJIC)的影响;利用Western blot法检测含药淋巴上清对大鼠肝癌CBRH7919细胞Cx43蛋白表达的影响;利用GJ阻滞剂甘草次酸(GA)观察阻滞GJIC后,含药淋巴细胞上清联合tk/GCV系统对细胞杀伤作用的影响。【结果】流式细胞术结合荧光示踪法结果表明,占培养液15%(体积分数)的含药淋巴上清能促进大鼠肝癌CBRH7919细胞的GJIC功能;Western blot法结果显示,含药淋巴细胞上清能提高大鼠肝癌CBRH7919细胞Cx43蛋白的表达水平;GA阻断GJIC功能后,含药淋巴细胞上清联合tk/GCV系统对细胞杀伤作用降低。【结论】六味地黄丸入血成分处理的淋巴上清可通过缝隙连接机制发挥对自杀基因杀伤大鼠肝癌细胞的增效作用。

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