| 瘢痕疙瘩抑制消减cDNA文库构建和质量分析对筛选和克隆瘢痕疙瘩相关基因的意义 |
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| 引用本文： | 罗勇,高建华,赵菲,张宝,周林.瘢痕疙瘩抑制消减cDNA文库构建和质量分析对筛选和克隆瘢痕疙瘩相关基因的意义[J].中国临床康复,2005,9(14):86-88. |
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| 作者姓名： | 罗勇 高建华 赵菲 张宝 周林 |
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| 作者单位： | [1]南方医科大学（原解放军第一军医大学）,南方医院整形外科,广东省,广州市,510515 [2]南方医科大学（原解放军第一军医大学）,基础部病理教研室,广东省,广州市,510515 [3]南方医科大学（原解放军第一军医大学）,基础部分子生物教研室,广东省,广州市,510515 |
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| 摘 要： | 目的:构建瘢痕疙瘩抑制消减cDNA库,为进一步筛选、克隆瘢痕疙瘩特异表达的基因奠定基础.方法:实验于2003-09/2004-08在南方医科大学基因工程研究所完成.从同一标本的瘢痕疙瘩和正常皮肤组织分离poly(A) RNA,经反转录后,利用抑制消减杂交方法,通过两轮杂交和两次抑制聚合酶链反应构建了两种组织间差异表达基因的cDNA消减库.结果:挑取了84个克隆进行聚合酶链反应扩增检测是否有插入片段,结果显示71个克隆有插入片段,其中45个克隆片段大小范围为200～750 bp,符合预期的库构建要求.结论:应用消减杂交的方法,在去除相同遗传背景的条件下,可以建立较特异的瘢痕疙瘩cDNA消减库,该库为进一步批量筛选瘢痕疙瘩发生相关基因群和克隆瘢痕疙瘩特异表达基因奠定了基础,为创伤临床康复治疗提供理论依据.
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| 关 键 词： | 瘢痕疙瘩 杂交 基因文库 |
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