旋转离心柱提取全血DNA在HLA基因分型中的应用

目的采用旋转离心柱提取人类基因组DNA，能更好的适用于临床肾移植特别是尸肾移植的HLA基因分型。方法18份EDTA-K。抗凝的2ml全血标本分别采用标准酚一氯仿法、快速盐析法和旋转离心柱法提取DNA，做HLA-DR基因分型。然后就所获DNA浓度和纯度、操作时间、分型结果3个方面进行统计学分析。结果3种方法提取的DNA平均含量差异无统计学意义；采用旋转离心柱法和标准酚氯仿法提取的DNA纯度高于快速盐析法差异有统计学意义；整个操作时间旋转离心柱快于标准酚氯仿法和快速盐析法，差异有统计学意义；5份全血标本采用这3种方法获得的模板DNA基因分型结果完全相同，差异无统计学意义。结论采用旋转离心柱提取人类白细胞DNA，操作简单、快速，总耗时60～70min，分型方法稳定、可靠，无一例失败，能更好的适用于临床肾移植特别是尸肾移植的HLA基因分型。