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结核菌WhiB7,drrA,drrB基因表达与其抗结核药物的耐受关系研究
引用本文:王星,史建中,刘镇,陈向东,李海,谢兰品,吕翠环,陈素丽,刘金录,邱景富. 结核菌WhiB7,drrA,drrB基因表达与其抗结核药物的耐受关系研究[J]. 临床肺科杂志, 2016, 0(12). DOI: 10.3969/j.issn.1009-6663.2016.12.013
作者姓名:王星  史建中  刘镇  陈向东  李海  谢兰品  吕翠环  陈素丽  刘金录  邱景富
作者单位:1. 张家口市肺科医院, 河北 怀来县,075441;2. 张家口市疾病预防控制中心, 河北 张家口,075000;3. 张家口市第六医院, 河北 张家口,075000;4. 河北省胸科医院, 河北 石家庄,050000;5. 河北北方学院, 河北 张家口,075000
基金项目:河北省科技计划项目(142777100D)
摘    要:目的探讨结核分枝杆菌耐药性与WhIB7,drrA,drrB基因表达的关系。方法通过设计并合成结核分枝杆菌的Whi B7,drrA,drrB基因引物,对耐药的结核分枝杆菌利用逆转录得到三个基因的c DNA。并对c DNA进行PCR扩增,通过优化PCR参数,使PCR方法达到检测c DNA拷贝数的准确性。分析WhIB7,drrA,drrB基因表达在不同类型耐药菌株的表达程度。使用药物刺激观察耐药菌株Whi B7,drrA,drrB基因的变化。结果逆转录荧光定量PCR可以对WhIB7,drrA,drrB基因很好的定量。对不同种耐药菌株进行WhIB7,drrA,drrB基因检测,阳性率分别为:单利福平耐药菌株85.0%(17/20)、35.0%(7/20)、30.0%(6/20),单异烟肼耐药菌株37.5%(12/32)、87.5%(28/32)、81.3%(26/32),利福平和异烟肼均耐药的菌株87.5%(14/16)、75.0%(12/16)、81.3%(13/16),含利福平异烟肼的多重耐药菌株88.2%(30/34)、82.4%(28/34)、85.3%(29/34),药物敏感菌株12.4%(12/97)、8.2%(8/97)、9.3%(9/97)。耐药菌株WhIB7,drrA,drrB基因阳性率高于药物敏感菌株。WhIB7基因与利福平耐药关系紧密,drrA和drrB基因与异烟肼耐药关系紧密。但不同的药物对耐药菌基因表达的诱导能力不同。结论 Whi B7,drrA,drrB基因的逆转录荧光定量PCR方法可以作为耐药结核分枝杆菌筛查的重要参考,为研究结核分枝杆菌日后基因表达与耐药机理研究奠定基础。

关 键 词:利福平  异烟肼  WhIB7  drrA  drrB

Research of the relationship between the expression of mycobacterrium tuberculosis WhIB7, drrA,drrB genes and anti-tuberculosis drug tolerance
Abstract:
Keywords:rafampin  isoniazide  WhIB7  drrA  drrB
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