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| 以报告基因荧光素酶研究HPRE功能元件与IFN-α应答的关系 | |
| 引用本文： | 姚文娟,刁振宇,邓小昭,孔晶,周宗安,高健,张云. 以报告基因荧光素酶研究HPRE功能元件与IFN-α应答的关系[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2006, 22(5): 575-578 |
| 作者姓名： | 姚文娟 刁振宇 邓小昭 孔晶 周宗安 高健 张云 |
| 作者单位： | 1. 南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210097 2. 南京军区军事医学研究所,江苏,南京,210002 3. 中国药科大学,江苏,南京,210009 |
| 摘 要： | 目的:以荧光素酶(luciferase,LUC)基因为报告基因,探讨HBV转录后调节序列(HPRE)的功能元件(α、β1和β2)对IFNα作用的影响。方法:用PCR法从载体pGEMluc中扩增LUC基因,并克隆入真核表达载体pcDNA3.0中。以含乙肝病毒(HBV)基因组的质粒A01为模板,扩增HPRE(完整的HPRE)、HPREαβ1及HPREβ1β2片段,并分别插入LUC基因的下游。利用脂质体介导的转染法,将重组质粒分别导入人肝癌细胞株HepG2中,用LUC检测系统检测IFNα作用前后LUC表达活性的变化。结果:经测序证实,重组质粒pcDNA3.0luc、pcDNA3.0lucHPRE、pcDNA3.0lucHPREαβ1及pcDNA3.0lucHPREβ1β2构建成功。检测结果显示,IFNα作用前,HPRE、HPREαβ1和HPREβ1β2均能提高LUC的活性,IFNα作用后,HPRE和HPREβ1β2能明显降低LUC的活性,而HPREαβ1对其表达则没有显著影响。结论:HPRE的功能元件β2与IFNα作用的关系最为密切,而功能元件α和β1在IFNα应答中作用甚小,提示IFNα诱导产生的HPRE抑制性结合蛋白很可能是与β2结合的,为进一步研究IFNα在治疗HBV感染和慢性肝炎中的作用机制,以及HPRE抑制性结合蛋白的作用提供了一定的实验依据。 |
| 关 键 词： | IFN-α 荧光素酶 转染 |
| 文章编号： | 1007-8738（2006）05-0575-04 |
| 收稿时间： | 2006-04-18 |
| 修稿时间： | 2006-05-31 |
Study on relationship between HBV post-transcriptional regulatory element and response to IFN-α by using a reporter gene luciferase |
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| YAO Wen-juan,DIAO Zhen-yu,DENG Xiao-zhao,KONG Jing,ZHOU Zong-an,GAO Jian,ZHANG Yun. Study on relationship between HBV post-transcriptional regulatory element and response to IFN-α by using a reporter gene luciferase[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2006, 22(5): 575-578 | |
| Authors: | YAO Wen-juan DIAO Zhen-yu DENG Xiao-zhao KONG Jing ZHOU Zong-an GAO Jian ZHANG Yun |
| Affiliation: | 1.Life Sciences College, Nanjing Normal University. Nanjing 210097; 2.Institute of Military Medical Sciences, Nanjing Command, Nanjing 210002; 3.Chinese Pharmacentic University, Nanjing 210009, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | HPRE |
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