脑源性神经营养因子真核表达载体转染人脐带间充质干细胞

背景：干细胞移植是神经损伤修复领域的研究热点，目前多数研究集中于神经干细胞和骨髓于细胞移植研究，而脐带间充质干细胞相关研究目前国内刚刚起步，后者较前者具有来源广泛，伦理限制少等优势。目的：构建脑源性神经营养因子真核表达载体，并将其转染至人脐带间充质干细胞中，建立稳定表达脑源性神经营养因子的细胞模型。方法：应用反转录PCR获得脑源性神经营养因子的基因序列，然后将脑源性神经营养因子的基因序列插入到pcDNAⅢ载体的多克隆位点，构建脑源性神经营养因子蛋白表达载体，并转染脐带间充质干细胞；Western Blot体外检测携带脑源性冲经营养因子基因的脐带间充质于细胞的脑源性神经营养因子蛋白表达水平：取培养好的PC12细胞和胎鼠皮质神经元加入含脑源性神经营养因子的脐带间充质干细胞培养基，检测脑源性神经营养因子蛋白的生物活性。结果与结论：成功构建脑源性神经营养因子真核表达载体，该载体能在脐带间充质干细胞中高水平表达脑源性神经营养因子蛋白，表达的脑源性神经营养因子蛋白体外检测具有生物活性。可见脐带间充质干细胞有可能作为脑源性神经营养因子真核表达载体用于神经损伤修复研究。

Transfection of an eukaryotic expression vector expressing brain derived neurotrophic factor into human umbilical cord mesenchymal stem cells