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| 卡介苗HSP70的表达、纯化及活性检测 | |
| 引用本文： | 李贺,曹昭,张培因,卫红飞,王华,孙陆果,王丽颖,于永利.卡介苗HSP70的表达、纯化及活性检测[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(12). |
| 作者姓名： | 李贺 曹昭 张培因 卫红飞 王华 孙陆果 王丽颖 于永利 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学白求恩医学院免疫学教研室,吉林,长春,130021;北华大学药学院药理学教研室,吉林,吉林,132013 2. 吉林大学白求恩医学院分子生物学教研室,吉林,长春,130021 3. 吉林大学白求恩医学院免疫学教研室,吉林,长春,130021 |
| 基金项目： | 吉林省重大科技发展计划项目 |
| 摘 要： | 目的:在大肠杆菌中表达并纯化出具有良好生物学活性的卡介苗HSP70(BCG HSP70)蛋白.方法:利用PCR技术扩增出BCG HSP70的编码基因,将其克隆到pMD18-T载体,测序分析.再将该目的基因亚克隆至pET28a表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3),获得正确的阳性克隆子后,用IPTG诱导表达.纯化表达产物,SDS-PAGE及Western blot鉴定目的蛋白,并通过脾增生实验检测其生物学活性.结果:扩增的BCG HSP70基因经序列测定与GenBank公布的序列完全一致.表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量(Mr)约70 000处有表达条带.Western blot结果证实纯化产物在Mr约70 000处可见特异性条带.蛋白纯度约96.5%.脾细胞增生试验显示,该蛋白能够明显刺激鼠脾细胞增殖.结论:成功表达并纯化了具有良好生物学活性的BCG HSP70,为进一步研究BCG HSP70及BCG的功能奠定了基础. |
| 关 键 词： | 卡介苗 |
Expression, purification and activity analysis of BCG HSP70 |
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| Abstract: | |
| Keywords: | HSP70 pET28a |
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