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化学合成siRNA阻断小鼠骨髓源性不成熟树突状细胞GAPDH基因的表达
引用本文:顾晓冬,项建斌,陈宗祐,姚宇锋.化学合成siRNA阻断小鼠骨髓源性不成熟树突状细胞GAPDH基因的表达[J].复旦学报(医学版),2006,33(6):802-806.
作者姓名:顾晓冬  项建斌  陈宗祐  姚宇锋
作者单位:复旦大学附属华山医院普外科,上海,200040
基金项目:国家自然科学基金;高等学校博士学科点专项科研项目;复旦大学校科研和教改项目
摘    要:目的 观察化学合成siRNA在转录后水平降低小鼠不成熟树突状细胞基因表达的效率及其影响因素。方法 体外取小鼠胫骨和股骨的骨髓,分离、培养不成熟树突状细胞,应用化学合成的不同浓度siRNA在LipofectAMINE2000转染试剂介导下转染树突状细胞,流式细胞仪检测siRNA的转染效率,RT-PCR检测小鼠不成熟树突状细胞中GAPDHmRNA水平的变化,锥虫蓝染色测定各组中培养细胞的存活率。结果 转染终浓度为100~600nmol/L的siRNA能特异有效地阻断GAPDH基因的表达,而转染终浓度为50~400nmol/L的siRNA对细胞具有低毒性。结论 siRNA能在不成熟树突状细胞内启动RNA干扰作用,400nmol/L的siRNA能在特异有效地阻断内源性基因表达的同时,最大限度地保持细胞活力。

关 键 词:树突状细胞  RNA干扰
收稿时间:2006-02-20
修稿时间:2006年2月20日

Blocking with chemically synthesized siRNA of the gene expression of GAPDH in bone marrow-derived immature murine dendritic cells
GU Xiao-dong,XIANG Jian-bin,CHEN Zong-you,YAO Yu-feng.Blocking with chemically synthesized siRNA of the gene expression of GAPDH in bone marrow-derived immature murine dendritic cells[J].Fudan University Journal of Medical Sciences,2006,33(6):802-806.
Authors:GU Xiao-dong  XIANG Jian-bin  CHEN Zong-you  YAO Yu-feng
Abstract:
Keywords:siRNA  GAPDH
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