| 人髓核软骨样细胞的生物学特性观察 |
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| 引用本文： | 张荣峰,阮狄克,张超,辛洪奎. 人髓核软骨样细胞的生物学特性观察[J]. 中国脊柱脊髓杂志, 2008, 18(11) |
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| 作者姓名： | 张荣峰 阮狄克 张超 辛洪奎 |
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| 作者单位： | 海军总医院骨科,100037,北京市 |
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| 摘 要： | 目的:探讨人髓核软骨样细胞的生物学特性,为组织工程椎间盘种子细胞的选取提供依据.方法:髓核组织取材于3例脊柱侧凸行前路矫形手术者(年龄11～13岁),依次用0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶分离髓核细胞,用含10%胎牛血清(FBS)的F12培养液培养细胞,取传1～7代次细胞进行光镜、电镜检查,观察细胞形态学改变,对细胞计数、二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)摄取进行比较,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞的聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅰ型和Ⅱ型胶原蛋白信使RNA(mRNA)的表达情况.结果:体外培养条件下,传3代之前的细胞形态正常,胞浆丰富;传4代起.部分细胞的形态逐渐向长梭形演化.与传1代细胞相比,传2、3代细胞数量增殖无明显减缓(P>0.05),传4代细胞第4天开始生长减慢(P<0.05),传5Ⅰ7代细胞第2天即较转1代细胞数量明显减少(P<0.05).传1Ⅰ3代细胞的MTT摄取吸光度值差异无统计学意义(P>0.05),和传1代相比,传4代具有统计学差异(P<0.05),传5Ⅰ7代的差异更显著(P<0.01).聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原在传3代之前各代次的mRNA表达量间无统计学差异(P>0.05),和传1代相比,Ⅱ型胶原从第4代起表达量显著下降(P<0.05),聚集蛋白聚糖从第5代起表达量显著下降(P<0.05),而从传5代起髓核软骨样细胞开始表达Ⅰ型胶原:结论:髓核细胞传代后前3代细胞形态良好,增殖能力强,聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达良好,适合作为组织工程椎间盘的种子细胞.
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| 关 键 词： | 髓核 细胞培养 聚集蛋白聚糖 Ⅱ型胶原 Ⅰ型胶原 组织工程 |
Research on biological characteristics of human chondrocyte-like cells in nucleus pulposus |
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| ZHANG Rongfeng,RUAN Dike,ZHANG Chao,et al. Research on biological characteristics of human chondrocyte-like cells in nucleus pulposus[J]. Chinese Journal of Spine and Spinal Cord, 2008, 18(11) |
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| Authors: | ZHANG Rongfeng RUAN Dike ZHANG Chao et al |
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| Affiliation: | ZHANG Rongfeng,RUAN Dike,ZHANG Chao,et al Department of Orthopaedic Surgery,Navy General Hospital,Beijing,100037,China |
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