| 甲3型流行性感冒病毒环介导逆转录等温扩增检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 姜晓慧,陈寅,卢亦愚,严菊英,冯燕,徐昌平,李榛,周敏,李敏红.甲3型流行性感冒病毒环介导逆转录等温扩增检测方法的建立与应用[J].中国计划免疫,2008,14(3). |
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| 作者姓名： | 姜晓慧 陈寅 卢亦愚 严菊英 冯燕 徐昌平 李榛 周敏 李敏红 |
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| 基金项目： | 浙江省医药卫生科技计划，浙江省与卫生部共建重点项目，浙江省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 建立适用甲3型流行性感冒(流感)病毒核酸检测的环介导逆转录等温扩增(RT-LAMP)方法,为基层实验室流感快速诊断服务.方法 对甲3型流感病毒设计两对环介导特异性引物与一个环引物,采用环介导RT-LAMP技术对甲3型流感病毒核酸进行等温扩增,并对反应体系进行优化.结果 采用RT-LAMP技术检测甲3型流感病毒核酸,敏感度可达0.01TCID50/反应,与荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的敏感度相一致,且对H1和H5亚型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、风疹病毒、流行性腮腺炎病毒、副流感病毒与腺病毒无交叉反应,具有良好的特异性.采用该方法检测58份临床样本,病毒分离的阳性率为37.9%,而荧光定量RT-PCR与RT-LAMP的阳性率分别为53.45%和51.72%,敏感度明显高于通常的细胞病毒分离.结论 甲3型流感病毒环介导RT-LAMP检测方法,不仅快速特异、敏感性强,而且简便价廉,适于基层实验室使用.
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| 关 键 词： | 环介导逆转录等温扩增 甲3型流行性感冒病毒 荧光定量逆转录-聚合酶链反应 |
Development and Application of Loop-mediated Isothermal Amplification Assay (LAMP) for Detection of Influenza Virus Subtype H3 |
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