| 正反义人PIN1基因克隆及真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 熊文化,陈安民,郭风劲,张衣北,黄涛. 正反义人PIN1基因克隆及真核表达载体的构建[J]. 华中医学杂志, 2006, 30(3): 217-218,240 |
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| 作者姓名： | 熊文化 陈安民 郭风劲 张衣北 黄涛 |
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| 作者单位： | 430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科 |
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| 摘 要： | 目的 克隆正、反义人PIN1基因（hPIN1）及构建hPIN1基因正、反义真核表达载体.方法 应用RT-PCR技术从人骨肉瘤细胞系MG-63细胞总RNA中成功扩增出990bp包含hPIN1基因编码区的cDNA序列,按正、反方向加上BamHⅠ及 HindⅢ双酶切位点后形成正、反义hPIN1基因,然后连入含BamHⅠ及 HindⅢ双酶切位点的pIRES2-EGFP表达质粒上,构建正、反义hPIN1基因的重组真核表达质粒phPIN1.结果 扩增的cDNA经测秩序与基因文库完全一致;BamHⅠ及HindⅢ双酶切后,正、反义表达质粒形成5.3 ＋0.99kb 两条带,与理论计算值完全一致.结论 成功克隆正、反义人PIN1基因及构建hPIN1基因的正、反义真核表达载体.
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| 关 键 词： | PIN1 异构酶 反义基因 真核表达载体 |
| 收稿时间： | 2005-12-21 |
| 修稿时间： | 2005-12-21 |
Cloning and construction of sense and antisense eukaryotic expression vector of human PIN1 |
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| Xiong Wenhua,Chen Anmin,Guo Fengjing et al. Cloning and construction of sense and antisense eukaryotic expression vector of human PIN1[J]. Central China Medical Journal, 2006, 30(3): 217-218,240 |
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| Authors: | Xiong Wenhua Chen Anmin Guo Fengjing et al |
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| Affiliation: | Department of Orthopedic, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PIN1 |
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