| siRNA沉默mfn2表达对睾酮抑制大鼠血管平滑肌源性泡沫细胞形成的影响 |
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| 引用本文： | 周炜,陈曼华.siRNA沉默mfn2表达对睾酮抑制大鼠血管平滑肌源性泡沫细胞形成的影响[J].基础医学与临床,2016(10):1323-1328. |
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| 作者姓名： | 周炜 陈曼华 |
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| 作者单位： | 武汉市中心医院心内科,湖北武汉,430014 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81300214)，湖北省自然科学基金(2013CFB378) |
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| 摘 要： | 目的研究线粒体融合素2基因(mfn2)在睾酮抑制大鼠血管平滑肌源性泡沫细胞形成过程中的作用。方法设计并化学合成靶向mfn2基因的小分子干扰RNA(siRNA),脂质体法将mfn2-siRNA转染大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测mfn2 mRNA及蛋白的表达。培养大鼠VSMCs,利用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导形成泡沫细胞。实验分组:1)对照组;2)睾酮组;3)睾酮+阴性对照siRNA组;4)睾酮+mfn2-siRNA组。后3组预先加入睾酮和(或)siRNA预处理12 h,再与ox-LDL共培养48 h。油红O染色及酶荧光法检测细胞内脂质含量,免疫印迹法检测细胞内Mfn2、清道夫受体CD36和ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)的表达。结果转染mfn2-siRNA后12、24、36和48 h均能有效沉默mfn2 mRNA和蛋白的表达(P0.05)。与对照组比较,睾酮组及睾酮+阴性对照siRNA组脂质蓄积减少,总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量均降低(P0.05),Mfn2和ABCA1表达增加(P0.05),CD36表达降低(P0.05),细胞泡沫化受到抑制。与睾酮+阴性对照siRNA组比较,睾酮+mfn2-siRNA组脂质蓄积增加,总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量均增加(P0.05),Mfn2和ABCA1表达降低(P0.05),CD36表达增加(P0.05)。结论睾酮通过调节mfn2及其下游CD36和ABCA1表达,抑制ox-LDL诱导下VSMCs转变为泡沫细胞。
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| 关 键 词： | 小分子干扰RNA 线粒体融合素2 睾酮 血管平滑肌细胞 泡沫细胞 |
Effects of mfn2 siRNA on nibitition of vascular smooth cell derived foam cells formation by testosterone in rats |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | small interfering RNA mitofusin 2 testosterone vascular smooth muscle cells foam cells |
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