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X射线对转染Smac基因重组质粒的MCF-7细胞表达及增殖和凋亡的影响
引用本文:梁硕,李艳博,郭彩霞,王志成,关锋,龚守良.X射线对转染Smac基因重组质粒的MCF-7细胞表达及增殖和凋亡的影响[J].中国老年学杂志,2010,30(18).
作者姓名:梁硕  李艳博  郭彩霞  王志成  关锋  龚守良
作者单位:1. 吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室,吉林,长春,130021
2. 首都医科大学公共卫生学院与家庭医学学院
3. 吉林大学第一医院核医学科
基金项目:国家自然科学基金资助项目 
摘    要:目的探讨Egr-1启动子介导Smac基因的重组质粒pshuttle-Egr1-hSmac的辐射诱导特性,以及联合X射线照射后对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法将构建完全正确的pshuttle-Egr-1-hSmac质粒转染到人乳腺癌MCF-7细胞中,24h后给予X射线照射,24h后提取总RNA和蛋白,分别采用RT-PCR和Western印迹法检测细胞中SmacmRNA和蛋白的表达;分别采用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡的变化。结果未照射组及转染和空载体pshuttle组未见SmacmRNA和蛋白表达;而转染pshuttle-Egr-1-hSmac的MCF-7细胞在0.5Gy照射后未见其mRNA和蛋白表达;1、2和5Gy照射后明显增高,尤其以5Gy表达最高;2Gy照射后4h未见表达,而8~48h则逐渐增加,尤其以48h最高。MTT结果显示,转染了pshutlle质粒后存活率稍有降低,而凋亡未见明显变化;转染pshuttle-Egr-1-hSmac质粒后细胞存活率未见明显降低,而凋亡百分率稍有增加(P0.05);经过2Gy照射后各组存活率降低,凋亡百分数明显增加(P0.05,P0.01),尤其以转染pshuttle-Egr-1-hSmac质粒更明显。结论X射线照射联合pshuttle-Egr1-hSmac能通过提高细胞内Smac的表达,并有效抑制MCF-7细胞增殖,促进细胞凋亡,提示Smac基因联合放射治疗可能成为肿瘤治疗的新策略。

关 键 词:Smac基因  X射线  基因-放射治疗  细胞凋亡

Effect of X-rays on expression, proliferation and apoptosis in MCF-7 cells transfected with Smac gene recombination plasmid
Abstract:
Keywords:
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