嵌合型TCR分子的表达与组装效率分析 |
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引用本文: | 苏畅,刘婷,黄帼蓉,陈楚如,向静,徐畅,张文峰,沈晗,邵红伟. 嵌合型TCR分子的表达与组装效率分析[J]. 广东药学院学报, 2016, 0(3): 362-365. DOI: 10.16809/j.cnki.1006-8783.2016011102 |
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作者姓名: | 苏畅 刘婷 黄帼蓉 陈楚如 向静 徐畅 张文峰 沈晗 邵红伟 |
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作者单位: | 广东药科大学生命科学与生物制药学院/生物制药研究所/广东省生物技术候选药物研究重点实验室,广东广州,510006 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31100664;31400149),广东省自然科学基金项目(2014A030313586) |
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摘 要: | 目的 通过对外源TCR分子结构域的定向改造,对嵌合型TCR双链分子的表达与组装情况进行研究,探讨其对TCR基因修饰T细胞(TCR-T)内外源TCR分子与内源TCR分子错配减少的贡献,为改善TCR基因修饰的T细胞过继性免疫治疗奠定基础.方法 将结构域未改造的野生型TCR分子、恒定区结构域经过改造的嵌合TCR(chim-TCR)分子及杂合TCR分子转染7402细胞,通过报告基因的表达分析TCR分子的表达情况,利用荧光共振能量转移(FRET)技术计算不同的TCR分子组合在细胞中的组装效率.结果 TCR分子经过结构域定向改造后,能够在细胞内有效地表达和组装.荧光共振能量转移(FRET)分析表明嵌合型TCR与野生型TCR分子之间形成的杂合分子FRET值明显小于嵌合型或野生型自身配对的FRET值.结论 结构域定向改造的嵌合型TCRα、β链与野生型α、β双链能有效得到表达及组装,并且嵌合型TCRd、β链与野生型α、β链组装配对的效率显著降低,这为改善基因修饰的T细胞过继性免疫治疗奠定了基础.
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关 键 词: | 嵌合型TCR 表达 组装 荧光共振能量转移技术 |
Study on the expression and pairing efficiency of recombinant TCR |
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Abstract: | |
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Keywords: | chimeric TCR expression assembly FRET |
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