ABO血型基因突变导致正反定型不符分析

目的对临床检测中1例ABO血型正反定型不符病人进行血清学及分子生物学研究，明确病人ABO血型，阐述其正反定型不符原因及分子生物学机制。方法采用血清学及分子生物学技术，鉴定正反定型不符病人血型及血清中意外抗体，并对病人样本进行ABO血型基因直接测序，PCR扩增编码ABO基因第6、第7外显子编码区序列，以公认的A101（ABO*A1.01）等位基因序列做为参考序列比对，分析待测样本DNA序列，明确样本ABO表型及基因型。结果病人样本血清学结果正定型为A型，样本红细胞与单克隆抗-A反应弱阳性，但其红细胞与抗-A1抗体反应阴性；样本反定型为O型，血清与A1试剂红细胞反应弱阳性、与A2试剂细胞反应阴性，其血清不规则抗体筛查阴性，证实样本血清存在抗-A1意外抗体；样本测序结果显示病人在ABO基因第6外显子出现c.297A>G（ACA>ACG）、第7外显子出现c.771C > T（CCC > CCT）及c.646T > A（AGT > AGA）的等位基因突变。结论血清学试验检测病人ABO血型为A亚型，血清中产生抗-A1意外抗体，导致病人正反定型不符。病人ABO基因6号外显子的c.297A>G及7号外显子的c.771C>T突变，氨基酸编码并无改变，属于无义突变。而通过比对血型抗原基因突变资料库注册的ABO表型，分析病人为Ax/Aweak表型，该表型基因ABO*AW.30.01第7外显子的c.646T>A突变（导致氨基酸Phe216Ile改变）正是其表型形成的分子基础。