猪肾上皮细胞Ⅰ型干扰素受体1敲除对伪狂犬病毒复制的影响 |
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作者姓名: | 邵科宇 张爽 段利芳 马英先 郭玉堃 李佳佳 刘晓贺 杜永坤 褚贝贝 |
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作者单位: | 河南农业大学农业农村部动物生化与营养重点开放实验室,郑州,450002 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;霍英东教育基金会高等院校青年教师基金;转基因生物新品种培育重大专项;优势特色学科建设经费 |
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摘 要: | 目的 探讨Ⅰ型干扰素受体1 (IFNAR1) 对伪狂犬病病毒 (PRV) 复制的影响。 方法 以慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建猪肾上皮细胞 (PK15) 敲除IFNAR1基因的稳定细胞系。运用细胞活力检测、荧光观察、流式细胞术检测、滴度测定、Real-time PCR等技术进行IFNAR1功能验证。 结果 随着PRV感染时间延长,敲除IFNAR1基因可以显著促进PRV-TK mRNA的转录,PRV-gE蛋白的翻译以及子代病毒的毒力。 结论 IFNAR1在抑制PRV增殖中发挥重要作用。
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关 键 词: | 猪肾上皮细胞 Ⅰ型干扰素受体1 伪狂犬病病毒 基因编辑 免疫印迹法 实时定量聚合酶链反应 猪 |
收稿时间: | 2019-02-10 |
修稿时间: | 2019-06-06 |
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