| IL-35重组卡介苗的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 吕平,彭万胜,董淮富.IL-35重组卡介苗的构建及鉴定[J].蚌埠医学院学报,2020,45(7):849-853, 858. |
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| 作者姓名： | 吕平 彭万胜 董淮富 |
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| 作者单位： | 蚌埠医学院第一附属医院 儿科(现工作于安徽省蚌埠市第一人民医院 儿科), 安徽 蚌埠 233004 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学青年基金项目1608085QH18 |
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| 摘 要： | 目的构建分泌性表达白细胞介素（IL）-35真核载体pZM03（pBudCE4.1/GLS/IL35/OriM）-重组卡介苗（BCG）。方法在化学合成的IL-35基因片段中插入pBudCE4.1/GLS/OriM，将合成后序列插入到IL-12真核共表达载体pBudCE4.1/GLS/IL12/OriM的质粒酶切回收产物pBudCE4.1/GLS/OriM中，构建表达IL-35的穿梭/共表达质粒重组质粒pZM03（pBudCE4.1/GLS/IL35/OriM），再以重组质粒电转化到BCG，构建表达IL-35和BCG的重组pBudCE4.1/GLS/IL35/OriM-BCG。结果重组质粒pZM03（pBudCE4.1/GLS/IL35/OriM）经PCR扩增、测序鉴定，以及在CHO 293T细胞中表达产物的Western blotting检测，从转录和翻译水平对目标基因产物进行检测验证，pBudCE4.1/GLS/IL35/OriM-BCG在细胞水平经抗酸染色验证，证实基因IL-35正确插入载体pBudCE4.1/GLS/OriM中，且pBudCE4.1/GLS/IL35/OriM-BCG构建成功。结论重组质粒pBudCE4.1/GLS/IL35/OriM-BCG可正确表达IL-35，为进一步研究IL-35功能及其应用价值奠定了良好的基础。
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| 关 键 词： | 卡介苗 白细胞介素-35 重组质粒 |
| 收稿时间： | 2018-08-06 |
Construction and identification of the IL-35-BCG recombinant vaccine |
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| Affiliation: | Department of Pediatrics, The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu Anhui 233004, China |
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