儿童先天性心脏病TBX20基因突变及功能探讨

目的：对先天性心脏病（先心病）患儿进行TBX20基因突变研究，探讨TBX20基因与先心病发生机制之间的关系。方法：对203例中国汉族先心病患儿（病例组）进行TBX20基因编码区测序，同期300例门诊体检健康儿童为对照组，检测可能的先心病相关性基因突变。对新发现的突变应用蛋白质结构预测服务器I-TASSER进行同源建模，对TBX20基因野生型及突变后的蛋白质结构模型进行预测分析。并进一步构建TBX20野生型及突变型表达载体，分别转染到COS7细胞中,通过双荧光素酶报告基因检测它们在NKX2.5、GATA4协同作用下对下游靶基因心钠素（ANF）启动子转录激活作用的影响。结果：（1）病例组1例房间隔缺损患儿发现一个新的TBX20基因错义突变c.187G>A(A63T),DNA序列中第187位鸟嘌呤突变为腺嘌呤，导致氨基酸序列中第63位丙氨酸变为苏氨酸，在对照组中均未发现该变异。（2）对错义突变A63T进一步研究中，TBX20同源建模显示第63位的非极性、疏水性丙氨酸变为极性、亲水性的苏氨酸，与Gly65、Gly68间的氢键断裂，与Asp62、His64形成新的氢键，导致蛋白质构象发生变...