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荧光恒温扩增技术检测肠道病毒71型方法的建立与评价
引用本文:曹凌峰,苏犁云,董妞妞,徐锦.荧光恒温扩增技术检测肠道病毒71型方法的建立与评价[J].检验医学,2014(11):1115-1119.
作者姓名:曹凌峰  苏犁云  董妞妞  徐锦
作者单位:复旦大学附属儿科医院临床检验中心,上海,201102
基金项目:上海市公共卫生优秀学科带头人计划
摘    要:目的利用荧光恒温扩增(SAT)技术建立一种快速可靠的肠道病毒71型(EV71)检测方法。方法通过设计特异性的EV71 RNA扩增引物及优化探针技术,使用M-MLV反转录酶及T7 RNA多聚酶对EV71 RNA进行核酸扩增,同时利用荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪进行实时的荧光信号收集和检测。检测复旦大学附属儿科医院儿童手足口病患儿粪便样本199例,以EV71型核酸检测试剂盒作参比方法,DNA测序为第三方验证方法,对研究数据进行Kappa一致性分析。结果 SAT技术共检测到119例EV71阳性样本,其中21例荧光探针法检测为阴性,经测序证实20例样本仍为阳性。SAT与荧光探针法检测结果的Kappa值为0.789。SAT方法的敏感性100%、特异性98.77%。结论本研究建立的EV71型RNA SAT技术具有敏感性高、特异性强、准确、快速可靠等优点,适用于临床对EV71感染的快速诊断。

关 键 词:肠道病毒  71    荧光恒温扩增技术  手足口病  敏感性  特异性

Establishment and evaluation of fluorescence isothermal amplification assay for the detection of Enterovirus 71
CAO Lingfeng,SU Liyun,DONG Niuniu,XU Jin.Establishment and evaluation of fluorescence isothermal amplification assay for the detection of Enterovirus 71[J].Laboratory Medicine,2014(11):1115-1119.
Authors:CAO Lingfeng  SU Liyun  DONG Niuniu  XU Jin
Institution:CAO Lingfeng, SU Liyun, DONG Niuniu, XU Jin
Abstract:
Keywords:Enterovirus 71  Fluorescence isothermal amplification assay  Hand  foot  mouth disease  Sensitivity  Specificity
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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