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二氢叶酸还原酶活力测定方法的建立及在基因转移中的应用
作者姓名:刘学英  魏康
作者单位:军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所
摘    要:二氢叶酸还原酶(DHFR)可催化二氢叶酸还原生成四氢叶酸。在此过程中还原型辅酶Ⅱ(TPNH)作为递氢体而消耗,其浓度随反应进行而下降。本文用分光光度法测定该酶活力,通过测定 TPNH 特征性的340nm 光吸收下降速度来表示酶活力。材料与方法 1.试剂:①缓冲液Ⅰ取250mmol/L Tris-HCl 缓冲液10ml,12.5mmol/L MgCl_210ml,750mmol/L KCl 10ml,15mmol/L 硫苏糖醇(DTT)1ml,水19ml 配成。②缓冲液Ⅱ500mmol/L Tris-HCl,

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