Hsa_circ_0001946/miR-7/KLF4轴调控乳腺癌进展的研究

目的探讨环状RNAhsa_circ_0001946在乳腺癌组织中的表达情况及hsa_circ_0001946/miR-7/Kruppel样因子4（KLF4）轴调控乳腺癌细胞发生侵袭和转移的机制。方法收集2018年6月至2019年8月在温州医科大学附属第三医院切除的乳腺癌组织标本及其癌旁正常乳腺组织标本91例。采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌及其癌旁正常组织中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4mRNA表达情况及乳腺癌细胞株MCF-7中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）mRNA表达情况；采用细胞侵袭实验分析乳腺癌MCF-7细胞株的侵袭能力；采用Westernblot法检测乳腺癌细胞株MCF-7中E-cadherin及N-cadherin蛋白表达情况。结果与癌旁正常乳腺组织比较，乳腺癌组织中hsa_circ_0001946和KLF4mRNA表达水平均升高，miR-7表达水平下降（均P＜0.05）。与正常乳腺组织、乳腺导管原位癌组织比较，乳腺浸润性导管癌组织中hsa_circ_0001946mRNA表达水平升高（均P＜0.05）。分析82例乳腺浸润性导管癌患者发现，有淋巴结转移者hsa_circ_0001946mRNA表达水平高于无淋巴结转移者（P＜0.05）。Pearson相关显示，乳腺癌组织中hsa_circ_0001946mRNA的表达与miR-7的表达呈负相关（r=-0.418，P＜0.05），miR-7的表达与KLF4mRNAmRNA的表达呈负相关（r=-0.340，P＜0.05）。与阴性对照组相比，转染sh-hsa_circ_0001946组MCF-7细胞中miR-7表达升高，KLF4mRNA表达下降（均P＜0.05）；与阴性对照组相比，转染miR-7mimics组MCF-7细胞中KLF4mRNA表达下降（P＜0.05）；与阴性对照组相比，转染sh-hsa_circ_0001946组侵袭细胞数减少（P＜0.05）；与阴性对照组相比，转染KLF4siRNA组MCF-7细胞中E-cadherinmRNA及蛋白表达水平均升高，N-cadherinmRNA及蛋白表达水平均下降（均P＜0.05）。结论Hsa_circ_0001946在乳腺癌细胞中表达升高，可通过miR-7/KLF4调控轴使癌细胞发生上皮-间质转化，促进癌细胞的侵袭和转移。