伊曲康唑促进AMPK磷酸化诱发结直肠癌细胞铁死亡的抗癌机制研究

目的探讨伊曲康唑（Itra）促进腺苷酸蛋白激酶（AMPK）磷酸化诱发结直肠癌（CRC）细胞铁死亡的抗癌机制。方法体外培养结肠癌HCT116细胞，并将细胞分为对照组、Itra组、Itra+AMPK抑制剂组（抑制剂组）和Itra+AMPKsiRNA干扰组（干扰组）；采用MTT法检测细胞存活率，活死细胞染色法检测死亡细胞比例，Westernblot法检测AMPK、磷酸化AMPK（p-AMPK）、胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、xCT蛋白表达水平，流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）含量，Hoechst染色法检测细胞凋亡率。结果与0滋mol/L组比较，0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、25.0、50.0、100.0滋mol/L的Itra处理48h后，HCT116细胞存活率均明显下降（均P＜0.05），IC50为（4.86±1.23）滋mol/L。活死细胞染色显示，2.5、5.0、10.0滋mol/L的Itra处理48h后，死亡细胞比例较0滋mol/L组均明显增加（均P＜0.05）。与0滋mol/L组比较，2.5、5.0、10.0滋mol/L的Itra处理48h后，HCT116细胞p-AMPK蛋白表达水平均明显增加（均P＜0.05）；以5.0滋mol/L为Itra的终浓度处理HCT116细胞12、24、48h后，p-AMPK蛋白表达水平亦明显增加（均P＜0.05）。与对照组比较，5.0滋mol/L的Itra处理48h后HCT116细胞内ROS含量及细胞凋亡率均明显增加（均P＜0.05），GPX4、xCT蛋白表达水平均明显下降（均P＜0.05）；与Itra组比较，抑制剂组、干扰组细胞内ROS含量及细胞凋亡率均明显下降（均P＜0.05），GPX4、xCT蛋白表达水平均明显增加（均P＜0.05）。结论体外研究证实Itra通过激活AMPK信号通路来增加CRC细胞内ROS含量，进而抑制GPX4、xCT蛋白表达，促使铁死亡的发生，最终抑制CRC细胞的增殖。