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幽门螺杆菌毒素相关基因的克隆、测序及表达
引用本文:李姁君,韩锋产,闫小君,苏成芝.幽门螺杆菌毒素相关基因的克隆、测序及表达[J].第四军医大学学报,2002,23(5):429-432.
作者姓名:李姁君  韩锋产  闫小君  苏成芝
作者单位:第四军医大学全军基因诊断技术研究所,陕西,西安,710033
摘    要:目的 分段扩增、克隆幽门螺杆菌毒素相关基因cag A中间区 cag1,cag2 ,并利用大肠杆菌系统表达 .方法 PCR法扩增 cag A基因 ,双脱氧中止法测序正确后 ,克隆入大肠杆菌表达载体 p BV2 2 0 ,受控于 PRPL 启动子 ,转化大肠杆菌 DH5α,4 2℃进行温度诱导 .结果  PCR分段扩增出 cag A中间区基因 cag1,cag2 ,分别为 975 ,75 5 bp,克隆入 p UC19质粒 ,测序正确 ;在 p BV中构建 cag1,cag2的重组表达载体p BVcag A1,p BVcag A2 ,工程菌诱导后 SDS- PAGE显示新生表达蛋白带 ,Mr:Cag136× 10 3,Cag2 2 7.9× 10 3,均与预期的 cag A蛋白 Mr一致 ,约占菌体总蛋白的 36 %和 2 4 % .结论 成功克隆分段扩增的 cag A中间区基因 ,并可在大肠杆菌DH5α中高效表达 .

关 键 词:毒素相关基因  基因克隆  基因表达  温度诱导  幽门螺杆菌毒素
文章编号:1000-2790(2002)05-0429-04
修稿时间:2001年4月8日

Cloning, sequencing and expression of the gene of Helicobacter pylori cag A
LI Xu Jun,HAN Feng Chan,YAN Xiao Jun,SU Cheng Zhi Institute of Genetic Diagnosis Technology of Chinese PLA,Fourth Military Medical University,Xi'an ,China.Cloning, sequencing and expression of the gene of Helicobacter pylori cag A[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2002,23(5):429-432.
Authors:LI Xu Jun  HAN Feng Chan  YAN Xiao Jun  SU Cheng Zhi Institute of Genetic Diagnosis Technology of Chinese PLA  Fourth Military Medical University  Xi'an  China
Institution:LI Xu Jun,HAN Feng Chan,YAN Xiao Jun,SU Cheng Zhi Institute of Genetic Diagnosis Technology of Chinese PLA,Fourth Military Medical University,Xi'an 710033,China
Abstract:
Keywords:Helicobacter pylori  cytotoxin  associated gene (  cag  A)  gene cloning  gene expression  temperature induce
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